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Cy3-NHS酯標(biāo)記蛋白或抗體后,如何高效純化?

2023年11月23日 11:09 來源:新維創(chuàng)生物科技(重慶)有限公司

          Cy3-NHS酯標(biāo)記蛋白或抗體后,如何高效純化?


(1)凝膠過濾層析法:將標(biāo)記反應(yīng)液通過大小孔徑合適的凝膠過濾柱,用適當(dāng)?shù)木彌_液洗脫,收集流出液中的Cy3-蛋白標(biāo)記物,并測定蛋白濃度和熒光強度。這種方法簡單快速,但可能會造成一些蛋白損失或稀釋。
(2)逆相高效液相色譜法(RP-HPLC):將標(biāo)記反應(yīng)液通過逆相C18柱,用不同比例的水和有機溶劑(如乙腈或甲醇)作為流動相進行梯度洗脫,收集適當(dāng)?shù)纳珟Х?,冷凍干燥后得到Cy3-蛋白標(biāo)記物。這種方法可以有效地分離和純化Cy3-蛋白標(biāo)記物,但需要專業(yè)的儀器和操作技術(shù)。以上技術(shù)服務(wù)重慶新維創(chuàng)生物均可提供。
(3)親和層析法:如果待標(biāo)記的蛋白具有特定的親和性,可以利用親和層析法進行純化。例如,如果待標(biāo)記的蛋白是抗體,可以用蛋白A或蛋白G柱進行純化;如果待標(biāo)記的蛋白是GST融合蛋白,可以用谷胱甘肽柱進行純化。這種方法可以保留蛋白的活性和穩(wěn)定性,但需要特定的親和配體和緩沖液。

材料供應(yīng)商:重慶新維創(chuàng)生物

 CY3-NHS.jpg


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