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2023年11月24日 14:16 來源:新維創(chuàng)生物科技(重慶)有限公司
在多肽熒光標(biāo)記中,通常其熒光分子的使用量是蛋白標(biāo)記使用量的數(shù)十倍,甚至百余倍,比如想拿到5mg 95%熒光標(biāo)記的多肽,至少需要200mg或300mg熒光分子。
多肽熒光標(biāo)記通常在多肽合成過程中,就已經(jīng)標(biāo)記上,此時(shí)其他所有活性基團(tuán)均被保護(hù)起來,所以多肽的熒光標(biāo)記是非常精準(zhǔn)的定點(diǎn)標(biāo)記,最后再通過HPLC純化,提高被標(biāo)記肽的純度至95%以上或98%以上。
打個(gè)比方:比如一段序列使用FITC標(biāo)記
序列為:H2N-D1-A2-G3-L4-E5-K6-G7-V8-K9-COOH
序列中有3個(gè)氨基,均可分別標(biāo)記上FITC,如
標(biāo)記在N端氨基上:FITC-D1-A2-G3-L4-E5-K6-G7-V8-K9
K6的側(cè)鏈氨基上:D1-A2-G3-L4-E5-K6(FITC)-G7-V8-K9
K9的側(cè)鏈氨基上:D1-A2-G3-L4-E5-K6-G7-V8-K9(FITC)
多肽熒光標(biāo)記后,通常會采用高濃度三氟乙酸處理,處于強(qiáng)酸環(huán)境中,然后通過HPLC純化。
新維創(chuàng)生物科技(重慶)有限公司
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