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2023年12月05日 14:28 來源：新維創(chuàng)生物科技（重慶）有限公司
熒光染料標記技術是一種常用于示蹤和檢測生物分子的重要工具?；钚詿晒馊玖贤ǔＳ糜跇擞浀鞍踪|(zhì)、核酸和其他生物分子，用于生命科學應用，包括熒光顯微鏡、流式細胞術、熒光原位雜交（FISH）、熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）技術、受體結(jié)合分析和酶分析。羧基熒光素在使用前必須要被激活，與之相比異硫氰酸熒光素（FITC）更具活性，F(xiàn)ITC主要是與巰基或者伯氨反應，如還原型半胱氨酸的側(cè)鏈，尤其是多肽或蛋白中的氨基。
在很多應用中，熒光基團可以在化學合成的過程中引入，在選擇性地去掉保護基團后，F(xiàn)ITC可以與賴氨酸（Lysine）或鳥氨酸（Ornithine）側(cè)鏈反應，或者與在合成過程中的多肽N端氨基反應。在N端標記時，在氨基和異硫氰酸鹽反應形成的硫脲鍵之間會引入一個烷基間隔基，如氨基己酸（Ahx）。
為什么要引入一個烷基間隔基呢？
多肽合成后需要在酸性條件下從樹脂上切割下來，在這種條件下N端FITC標記的多肽會產(chǎn)生一個環(huán)化的反應形成熒光素，隨后最后一個氨基被去除，而像Ahx這樣的間隔基引入后就可以避免這樣的反應。 有時候空間位阻是使用間隔基的主要原因，這樣多肽和FITC就可以沒有障礙的偶聯(lián)。 Ahx或者b-Ala均可作為間隔基用于FITC標記的多肽上 。
新維創(chuàng)生物科技（重慶）有限公司
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