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2023年12月07日 12:11 來源：新維創(chuàng)生物科技（重慶）有限公司
多肽熒光標(biāo)記染料介紹，常用的是Cy (Cyanine)系列？
Cy (Cyanine)系列,也叫菁染料，即花青素系列熒光染料是具有多聚次甲基橋鏈化學(xué)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)的一類合成熒光染料。Cy染料的次甲基橋鏈（1-7個次甲基）兩端常常連著兩個氮原子，其中一個氮原子帶正電，從而Cy染料形成具有離域正電荷效應(yīng)的介離子化合物。因為這個結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，Cy染料的消光系數(shù)（extinction coefficient）非常高。橋鏈長度和兩端的發(fā)色團(tuán)直接控制著染料的吸收峰和發(fā)射峰值，從而讓Cy系列染料可以覆蓋從紫外到遠(yuǎn)紅外的幾乎所有常用熒光譜帶。橋鏈長度和兩端的發(fā)色團(tuán)直接控制著染料的吸收峰和發(fā)射峰值，從而讓Cy系列染料可以覆蓋從紫外到遠(yuǎn)紅外的幾乎所有常用熒光譜帶。
由于細(xì)胞和組織的自發(fā)熒光在近紅外波段最小，因此在檢測復(fù)雜生物系統(tǒng)時，近紅外染料能提供更高的特異性和靈敏度。同時，由于光波在近紅外區(qū)段的組織透過性更好。菁染料的摩爾吸光系數(shù)在熒光染料中是最高的，Cy7 NHS ester, Cy5.5 amine 和Cy3 azide 的吸收在近紅外區(qū)背景非常低，是熒光強(qiáng)度最高、最穩(wěn)定的長波長染料。特別適合于活體小動物體內(nèi)成像代替放射性元素。
CY花菁染料的優(yōu)點(diǎn)：
1：摩爾吸光系數(shù)在熒光染料中是最高的
2：細(xì)胞和組織的自發(fā)熒光在近紅外波段最小
3：更高的特異性和靈敏度
4：光波在近紅外區(qū)段的組織透過性更好
5：染料細(xì)胞毒性小 可用于標(biāo)記抗體蛋白細(xì)胞。因此CY花菁染料是非常適合做小鼠活體成像的熒光染料
CY花菁染料的缺點(diǎn)：
1：熒光量子效率相比其他染料較低
2：容易發(fā)生聚集
多肽熒光標(biāo)記由于沒有放射性，實驗操作簡單。因此，目前在生物學(xué)研究中多肽熒光標(biāo)記應(yīng)用非常廣泛，多肽熒光標(biāo)記方法與熒光試劑的結(jié)構(gòu)有關(guān)系，對于有游離羧基的采用的方法與接多肽反應(yīng)相同，也采用HBTU/HOBt/DIEA方法連接。在N端標(biāo)記FITC的多肽需經(jīng)歷環(huán)化作用來形成熒光素，通常會伴有最后一個氨基酸的去除，但當(dāng)有一個間隔器如氨基己酸，或者是通過非酸性環(huán)境將目的多肽從樹脂上切下來時，這種情況可避免在切割的過程中被TFA切割掉。
可以利用熒光標(biāo)記的多肽來檢測目標(biāo)蛋白的活性，并將其發(fā)展的高通量活性篩選方法應(yīng)用于疾病治療靶點(diǎn)蛋白的藥物篩選和藥物開發(fā)（例如，各種激 酶、磷酸酶、肽酶等）。
新維創(chuàng)生物科技（重慶）有限公司
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