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2023年12月09日 09:55 來源:新維創(chuàng)生物科技(重慶)有限公司
菁類染料-Cy2,Cy3,Cy5
Cy2耦聯(lián)基團激發(fā)波長為 492nm,發(fā)光為波長 510nm 的綠色可見光Cy2 和FITC 使用相同的濾波片。由于 Cy2 比 FITC 在光下更穩(wěn)定。要避免使用含有磷酸化的苯二胺的封片劑,因為這種抗淬滅劑和 Cy2 反應(yīng),在染色片儲存后會導(dǎo)致熒光微弱和擴散。Cy3 和 Cy5 比其他的熒光團探針要更亮,更穩(wěn)定,背景更弱。Cy3 耦聯(lián)基團激發(fā)光的最大波長為 550nm,最強發(fā)射光為570nm。因為激發(fā)光和發(fā)射光波長很接近 TRITC, 在熒光顯微鏡中,可使用和 TRITC 一樣的濾波片。
Cy3 在氬光燈(514nm 或 528nm)下可以被激發(fā)出 50%的光強,在氦氖燈(543nm)或者汞燈(546nm)下則約75%。Cy3可以和熒光素一起作雙標(biāo)。Cy3 還可以和 Cy5一起在共聚焦顯微鏡實驗中作多標(biāo)記。
Cy5 耦聯(lián)基團的激發(fā)波長最大650nm,發(fā)光波長最大 670nm。在氪氬燈(647nm)下它們可被激發(fā)出98%的熒光,在氦氖燈下(633nm)為 63%Cy5 可以和很多其他的熒光基團一起用在多標(biāo)記的實驗中。由于它的最大發(fā)射波長在670nm,Cy5 很難用裸眼觀察,而且不能用汞燈作理想的激發(fā)。通常觀察 Cy5 時采用具有合活激發(fā)光和遠(yuǎn)紅外檢測器的共聚焦顯微鏡.在水相封片劑中應(yīng)當(dāng)加入抗淬滅劑。
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