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2023年12月12日 16:31 來源：新維創(chuàng)生物科技（重慶）有限公司
活體熒光成像技術(shù)主要有三種標(biāo)記方法
活體熒光成像技術(shù)主要有三種標(biāo)記方法。
（1）熒光蛋白標(biāo)記：熒光蛋白適用于標(biāo)記細胞、病毒、基因等。
（2）熒光染料標(biāo)記：熒光染料標(biāo)記和體外標(biāo)記方法相同，常用的有Cy3、Cy5、Cy5.5及Cy7，可以標(biāo)記抗體、多肽、小分子藥物等。
（3）量子點標(biāo)記：量子點（quantum dot)是一種能發(fā)射熒光的半導(dǎo)體納米微晶體，是由數(shù)百到數(shù)萬個原子組成的原子簇，尺寸在100nm以下，外觀恰似一極小的點狀物。量子點作為一類新型的熒光標(biāo)記材料，其在長時間生命活動監(jiān)測及活體示蹤方面具有獨特的應(yīng)用優(yōu)勢。與傳統(tǒng)的有機熒光試劑相比較，量子點熒光比有機熒光染料的發(fā)射光強的20倍，穩(wěn)定性強100倍以上，具有熒光發(fā)光光譜較窄、量子產(chǎn)率高、不易漂白、激發(fā)光譜寬、顏色可調(diào)，并且光化學(xué)穩(wěn)定性高，不易分解等諸多優(yōu)點。主要應(yīng)用在活細胞實時動態(tài)熒光觀察與成像，可以在長達數(shù)天內(nèi)進行細胞的分化和世系觀察, 以及細胞間、細胞內(nèi)及細胞器間的各種相互作用的原位實時動態(tài)示蹤。不但如此，量子點還可以標(biāo)記在其他需要研究的物質(zhì)上，如藥物、特定的生物分子等，示蹤其活動及作用。
熒光發(fā)光是通過激發(fā)光激發(fā)熒光基團到達高能量狀態(tài)，而后產(chǎn)生發(fā)射光。同生物發(fā)光在動物體內(nèi)的穿透性相似，紅光的穿透性在小動物體內(nèi)比藍綠光的穿透性要好得多，隨著發(fā)光信號在體內(nèi)深度的增加，波長越接近900nm的光線穿透能力越強，同時可消減背景噪音的干擾，近紅外熒光為觀測生理指標(biāo)的最佳選擇。在實驗條件允許的條件下，應(yīng)盡量選擇發(fā)射波長較長的熒光蛋白或染料。
分子探針的一端聯(lián)有能夠和生物體內(nèi)特異靶點結(jié)合的分子結(jié)構(gòu)（如肽類、酶的底物、配體等），另一端則是熒光染料。通過Cy5.5標(biāo)記的抗體的體內(nèi)代謝實驗，可見肝、腎等處的分布如圖所示
參考文獻：
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