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2023年12月14日 15:18 來源：新維創(chuàng)生物科技（重慶）有限公司
SA-HRP鏈霉親和素標記辣根過氧化物酶Streptavidin-HRP
鏈霉親和素（SA）因表面所帶正電荷少，且不含糖基，在實驗中的非特異性結(jié)合遠低于親和素，因此目前以鏈霉親和素標記的酶結(jié)合物更為常用。
1）.HRP-SA結(jié)合物的制備 采用過碘酸鈉直接標記：反應(yīng)在4℃進行，先在HRP中加入NaIO4，然后直接加鏈霉親和素溶液混勻，再用碳酸鹽緩沖液（PH9.0）透析后，用KBH4終止反應(yīng)：加飽和硫酸銨沉淀，離心后棄上清液，再用PBS復(fù)溶沉淀即得HRP-SA結(jié)合物．
2）.SA－生物素化HRP復(fù)合物的制備 按BNHS標記抗體法制備生物素化HRP（ HRP-B），再將HRP-B適當稀釋后，加入等體積的鏈霉親和素溶液（HRP-B與SA濃度比約1:4）反應(yīng)，即可制得SA－生物素化酶復(fù)合物（streptavidin-biotin-peroxidaes complex，SABC）.
3）.AP-SA結(jié)合物的制備 采用戊二醛二步法：先用飽和硫酸銨沉淀堿性磷酸酶，離心后加過量戊二醛溶液復(fù)溶堿性磷酸酶沉詫．戊二醛的一個醛基即與堿性磷酸醇的氨基結(jié)合：充分透析除去未結(jié)合戊二醛后，加鏈霉親和素與結(jié)合了堿性磷酸酶的戊二醛另一個醛基結(jié)合，用賴氨酸終止反應(yīng)，離心后留取含AP-SA結(jié)合物上清液備用。
新維創(chuàng)生物科技（重慶）有限公司
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