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2024年01月06日 13:55 來(lái)源:新維創(chuàng)生物科技(重慶)有限公司
1. 準(zhǔn)備FITC染料溶液:將適量的FITC染料溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲校缍谆鶃嗧浚―MSO)或二甲基亞酰胺(DMF),制備FITC染料的工作溶液。
2. 準(zhǔn)備多糖溶液:將要標(biāo)記的多糖溶解在適當(dāng)?shù)木彌_液中,如磷酸鹽緩沖液(PBS),以制備多糖的工作溶液。
3. 進(jìn)行反應(yīng):將FITC染料溶液加入到多糖溶液中,使其濃度適當(dāng),一般為FITC:多糖的摩爾比例為1:5到1:10。然后在適當(dāng)?shù)臈l件下進(jìn)行反應(yīng),例如在室溫下靜置反應(yīng)一段時(shí)間(30分鐘至1小時(shí))。
4. 反應(yīng)停止:加入一種抑制反應(yīng)的試劑,如甲醇或甘露醇,停止反應(yīng),并使未反應(yīng)的FITC染料中和。
5. 去除未反應(yīng)的染料:使用適當(dāng)?shù)南礈炀彌_液,如PBS,對(duì)標(biāo)記后的多糖進(jìn)行多次洗滌,以去除未反應(yīng)的FITC染料和雜質(zhì)。
6. 提取標(biāo)記多糖:通過(guò)合適的方法,如離心、分離膜、滲析等,將標(biāo)記后的多糖從洗滌液中提取出來(lái)。最后,將標(biāo)記多糖溶解在適當(dāng)?shù)娜芤褐羞M(jìn)行存儲(chǔ)或進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)應(yīng)用。
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