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2024年01月25日 10:11 來源：新維創(chuàng)生物科技（重慶）有限公司
FITC異硫氰酸熒光素Fluorescein isothiocyanate，是應用最為廣泛的一種熒光素，經(jīng)激光激發(fā)后發(fā)出明亮的黃綠色熒光，最大發(fā)射波長為525nm。FITC的熒光強度受PH影響較大，常隨著PH的降低而減弱。因此，在使用FITC時需格外注意溶液的酸堿度。
PE藻紅蛋白Phycoerythrin，是從紅藻中分離純化獲得的一種常見染料，經(jīng)激光激發(fā)后發(fā)出橙黃色熒光，最大發(fā)射波長為575nm。PE具有吸光性能好和光量子產(chǎn)率高的特點，可用于標記表達水平較低的蛋白。在流式細胞術檢測中，PE標記的抗體適用于所有配備488nm氬離子激光器的流式細胞儀。
Alexa Fluor 488的發(fā)射光譜與FITC幾乎一致，經(jīng)激光激發(fā)后發(fā)出綠色熒光，最大發(fā)射波長為519 nm，但其熒光強度和穩(wěn)定性要優(yōu)于FITC。一般來說，Alexa Fluor 488在pH 4-10范圍內(nèi)能保持較好的光穩(wěn)定性。
PE-Cy5是一種復合染料，屬于藻紅蛋白偶聯(lián)物，在此類復合染料中，激發(fā)能量可從PE傳遞到Cy5上，最大發(fā)射波長為667nm。由于PE-Cy5與FITC、PE在光譜上重疊范圍小，熒光干擾少，因此實驗中常將PE-Cy5與FITC、PE搭配使用。需注意，PE-Cy5不適合與APC搭配使用，兩者的光譜重疊范圍大。
PE-Cy5.5復合染料，能量從PE傳遞到Cy5.5上，最大發(fā)射波長為694nm。與PE-Cy5不同，PE-Cy5.5和APC之間的熒光干擾小，可搭配使用。并且，PE-Cy5.5的熒光強度要優(yōu)于PE-Cy5。
PE-Cy7復合染料，最大發(fā)射波長為785nm。PE-Cy7與FITC無光譜重疊，與APC重疊也較少，因此其可與FITC、PE、APC搭配使用。在實驗中需要注意，PE-Cy7的光淬滅性很強，需要絕對避光環(huán)境。
PerCP-Cy5.5復合染料，最大發(fā)射波長為695nm。PerCP的光量子產(chǎn)率較低，適用于表達水平較高蛋白的檢測，而PerCP-Cy5.5光量子產(chǎn)率高，可用于表達水平較低蛋白的檢測。在雙激光管儀器上與APC共同檢測時，需要做補償調(diào)節(jié)，但比PerCP補償少。
PI/7-AAD碘化丙啶（propidium iodide，PI）和7-AAD（7-amino-actinomycin D）的最大發(fā)射波長分別為617nm和647nm，常用于細胞凋亡檢測。在大部分流式細胞儀上，PI在FL2或FL3通道檢測，7-AAD在FL3通道檢測。7-AAD同PI有著相似的熒光特性，但其發(fā)射光譜較PI窄，對其他檢測通道的干擾更小，在多色熒光分析中是PI的最佳替代品。
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