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2024年02月07日 10:00 來源：新維創(chuàng)生物科技（重慶）有限公司
DAPI ，4',6-二脒基-2-苯基吲哚活細(xì)胞固定， 碘化丙啶，PI 染色劑
4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)是最常用的一種DNA 染色劑，其可與DNA 雙螺旋的 A-T 富集區(qū)域相結(jié)合。如果 DAPI 附著到 DNA 上，其熒光強(qiáng)度將比游離狀態(tài)要高。該染色劑受最大波長為358 nm的紫外光激發(fā)，其發(fā)射光譜非常寬，在461 nm 處達(dá)到峰值。此外，還可對(duì)弱熒光進(jìn)行 RNA 結(jié)合檢測。在這種情況下，發(fā)射波長將轉(zhuǎn)移至 500 nm。DAPI 能夠穿透整個(gè)細(xì)胞膜。因此，它可以用于固定活細(xì)胞。
Hoechst染料系列是 第二種被廣泛使用的DNA 染色劑，Hoechst 33258、Hoechst 33342以及Hoechst 34580 均為雙苯酰亞胺，可嵌入 A-T 富集區(qū)域，因此，該系列染料很少用到。與 DAPI 相似，這三種染色劑都可受最大發(fā)射波長為455 nm的紫外光激發(fā)，而未被結(jié)合的染色劑，其最大發(fā)射波長在 510–540 nm 之間。Hoechst 染色劑還具有細(xì)胞滲透性，因此可用于活細(xì)胞或已固定的細(xì)胞中。該染色劑與DAPI 的不同之處在于，它們的毒性較低。
碘化丙啶（PI）是一種不能透過細(xì)胞膜的 DNA 染色劑，無法進(jìn)入完整的細(xì)胞中，因此，該染色劑常用于區(qū)分細(xì)胞群中的活細(xì)胞和死細(xì)胞。該染色劑與核酸結(jié)合后，最大激發(fā)波長為538 nm，最大發(fā)射波長為 617 nm。此外，碘化丙啶還是一種嵌入劑，但對(duì)于不同的堿基并不存在結(jié)合的差異性。PI 還可結(jié)合 RNA，同時(shí)無需改變自身的熒光特性，因此為了區(qū)分DNA 和 RNA，有必要使用適當(dāng)?shù)暮怂崦浮?/p>
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