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2024年02月29日 14:58 來源:新維創(chuàng)生物科技(重慶)有限公司
Sulfo-CY5-COOH(也被稱為Sulfo-Cyanine5 carboxylic acid)是一種水溶性熒光染料,通常用于生物標記和成像。特別是在熒光成像和其他基于熒光的生化分析中。主要用于標記肽、蛋白質(zhì)和寡核苷酸等。
以下是Sulfo-CY5-COOH進行生物分子標記的一般步驟和注意事項:
染料溶解:Sulfo-CY5-COOH通常以粉末或凍干形式供應(yīng)。在使用前,需要將其溶解在適當?shù)娜軇┲?,如無水二甲基亞砜(DMSO)或甲醇。
染料濃度:根據(jù)應(yīng)用需求,確定合適的Sulfo-CY5-COOH濃度。通常,染料的濃度應(yīng)該在0.1至10毫摩爾之間,具體濃度取決于實驗條件和樣品。
共價偶聯(lián):若計劃將Sulfo-CY5-COOH用于標記其他分子(如抗體、蛋白質(zhì)或核酸),需要進行共價偶聯(lián)。這通常涉及將染料與靶分子中的氨基基團或其他適合的官能團反應(yīng)。在此過程中,應(yīng)確保遵循染料供應(yīng)商提供的協(xié)議。
反應(yīng)時間和溫度:在共價偶聯(lián)反應(yīng)中,應(yīng)控制反應(yīng)時間和溫度以確保反應(yīng)充分進行。通常,室溫下反應(yīng)1至2小時是常見的,但具體條件可能因?qū)嶒灦悺?/p>
標記驗證:在標記生物分子后,建議進行驗證以確保標記成功。這可能包括使用對照實驗、檢測標記后分子的熒光特性等。
避免光敏感性:Sulfo-CY5-COOH是光敏感的,因此在染料的制備、存儲和使用過程中要避光保護,以減少光降解的風險。
選擇合適的靶分子:在共價偶聯(lián)中,應(yīng)確保選擇適合的靶分子,并了解其官能團和反應(yīng)條件,以確保共價偶聯(lián)成功。
樣品處理:在進行細胞成像或生物分析之前,應(yīng)確保樣品的處理和準備方法不會影響染料的熒光性能。
pH穩(wěn)定性:Sulfo-CY5-COOH的熒光性能可能對pH值敏感,因此應(yīng)注意樣品的pH條件,以保持熒光穩(wěn)定性。
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