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2024年03月08日 15:33 來源:新維創(chuàng)生物科技(重慶)有限公司
產(chǎn)品名稱:水溶性菁染料cy5.5活性酯
英文名稱:Sulfo-CY5.5-NHS
產(chǎn)品類別:熒光染料
1、需要將Sulfo-Cy5.5-NHS溶于適當(dāng)?shù)娜軇┲?,例如DMSO或DMF,以使其達(dá)到一個適當(dāng)?shù)臐舛?。通常,這個濃度會在1~10 mM的范圍內(nèi)。
2、將待標(biāo)記的細(xì)胞或蛋白質(zhì)溶解在適當(dāng)?shù)木彌_液中,如PBS。確保樣品的濃度和純度都適合進(jìn)行熒光標(biāo)記。
3、將Sulfo-Cy5.5-NHS溶液加入到待標(biāo)記的樣品中,使其濃度達(dá)到一個適合反應(yīng)的水平,通常在10~100 μM之間。充分混合以確保染料與樣品均勻接觸。
4、將反應(yīng)液放置在適當(dāng)?shù)臈l件下進(jìn)行反應(yīng)。這通常需要在室溫下進(jìn)行,靜置一段時間,例如30~60分鐘。確保反應(yīng)過程中避免過強(qiáng)的光照,以防止熒光淬滅。
5、反應(yīng)完成后,需要添加一種能夠停止反應(yīng)的試劑,如氨基乙醇或其他胺類物質(zhì)。這一步的目的是使未反應(yīng)的Sulfo-Cy5.5-NHS中的活性基團(tuán)失活,從而防止進(jìn)一步的非特異性結(jié)合。
6、使用適當(dāng)?shù)姆椒?,如凝膠過濾或其他純化技術(shù),去除未反應(yīng)的Sulfo-Cy5.5-NHS和其他可能的副產(chǎn)物。這一步對于提高標(biāo)記的特異性和降低背景噪聲至關(guān)重要。
7、最后使用熒光顯微鏡或其他熒光檢測方法檢測標(biāo)記的細(xì)胞或蛋白質(zhì)。確保檢測條件能夠充分激發(fā)染料的熒光,并捕捉到相應(yīng)的信號。
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