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2024年05月06日 10:02 來源：http://www.yctengfei.cn/index.php?id=341
原液制備
1.蛋白準(zhǔn)備
為了獲得最佳標(biāo)記效果，請將蛋白(抗體)濃度配制為1 mg/mL。
1)蛋白溶液PH值應(yīng)為8.5±0.5，若pH低于8.0，則用1 M碳酸氫鈉進行調(diào)整。
2)若蛋白濃度低于1 mg/mL，標(biāo)記效率會大大降低，為了獲得最佳標(biāo)記效率，建議最終蛋白質(zhì)濃度范圍為1-10 mg/mL。
3)蛋白必須在不含伯胺(如Tris或甘氨酸)和銨離子的緩沖液中，否則會影響標(biāo)記效率。
2.染料準(zhǔn)備
將無水二甲基亞砜加入FITC小瓶中，制成10 mM儲備溶液，震蕩搖勻。
注：FITC要現(xiàn)配現(xiàn)用，避光。
3.染料用量計算
標(biāo)記反應(yīng)所需的FITC用量取決于要標(biāo)記蛋白的用量，F(xiàn)ITC與蛋白的最佳質(zhì)量比為1：50左右。
例：假如所需標(biāo)記蛋白為1 mL，2 mg/mL的IgG(MW=150,000)，用1 mL DMSO溶解一管1 mg FITC，則所需FITC體積為40μL。
異硫氰酸熒光素FITC FITC 3326-32-7
異硫氰酸熒光素-活性酯 FITC-NHS 117548-22-8
異硫氰酸熒光素-活性酯 5（6）-FAM-SE 117548-22-8
氨乙基(硫脲基熒光素)5-FITC-C2-NH2 75453-82-6
5-異硫氰酸熒光素乙二胺 5-FITC-C2-NH2 75453-82-6
5-羧基熒光素-馬來酰亞胺 5-FAM-MAL 787632-00-2
吲哚菁綠ICG ICG 3599-32-4
吲哚菁綠ICG-活性酯 ICG-NHS 1622335-40-3
吲哚菁綠ICG-氨基 ICG-NH2 1686147-55-6
吲哚菁綠ICG-馬來酰亞胺 ICG-MAL 2143933-81-5
吲哚菁綠ICG-羧基 ICG-COOH 181934-09-8
吲哚菁綠ICG-炔基 ICG-Alkyne 1622335-41-4
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