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2024年05月15日 13:53 來源：新維創(chuàng)生物科技（重慶）有限公司
1、準(zhǔn)備熒光染料：
首先，需要將CY5-NHS熒光染料溶解在適當(dāng)量的溶劑中，通常選擇DMSO、DMF等有機(jī)溶劑，因?yàn)镃Y5-NHS難溶于水。
溶解后的濃度應(yīng)調(diào)整為1-10 mM，以便后續(xù)與待標(biāo)記樣品混合。
2、準(zhǔn)備待標(biāo)記樣品：
待標(biāo)記的蛋白質(zhì)、抗體或其他生物分子應(yīng)溶解在適當(dāng)?shù)木彌_液中，如PBS（磷酸鹽緩沖液）。
3、標(biāo)記反應(yīng)：
將準(zhǔn)備好的CY5-NHS溶液加入到待標(biāo)記樣品中，使CY5-NHS的濃度為10-100 μM。
充分混合反應(yīng)液，確保染料與目標(biāo)分子上的胺基充分接觸并反應(yīng)。
將反應(yīng)液放置在室溫下靜置30-60分鐘，讓標(biāo)記反應(yīng)充分進(jìn)行。
4、停止反應(yīng)：
標(biāo)記完成后，需要添加氨基乙醇或其他胺類物質(zhì)來停止反應(yīng)，這樣可以確保未反應(yīng)的CY5-NHS中的NHS基團(tuán)失活，防止進(jìn)一步的非特異性標(biāo)記。
5、純化與檢測：
使用凝膠過濾、透析或其他純化方法去除未標(biāo)記的CY5-NHS和其他副產(chǎn)物。
純化后，可以使用熒光顯微鏡、熒光光譜儀或其他熒光檢測方法檢測標(biāo)記效果，確保熒光染料已成功標(biāo)記到目標(biāo)分子上。
請注意，以上步驟僅供參考，具體使用時(shí)可能需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)條件和目標(biāo)分子的特性進(jìn)行調(diào)整。此外，CY5-NHS熒光染料對光敏感，因此在實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)盡量避免強(qiáng)光直射，并在適當(dāng)?shù)臈l件下保存染料和標(biāo)記后的樣品。
脂溶性-CY5-羧基 CY5-COOH 1032678-07-1
水溶性-CY5-羧基 Sulfo-CY5-COOH 146368-11-8
脂溶性-CY5-氨基 CY5-NH2 1807529-70-9
水溶性-CY5-氨基 Sulfo-CY5-NH2 2183440-44-8
脂溶性-CY5-活性酯 CY5-NHS 1032678-42-4
水溶性-CY5-活性酯 Sulfo-CY5-NHS 2230212-27-6
脂溶性-CY5-馬來酰亞胺 CY5-MAL 1437796-65-0
水溶性-CY5-馬來酰亞胺 Sulfo-CY5-MAL 2242791-82-6
脂溶性-CY5-疊氮 CY5-N3 1782950-80-4
水溶性-CY5-疊氮 Sulfo-CY5-N3 1481447-40-8
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NHS-CY5活化酯Sulfo-CY5-NHS estre近紅外熒光染料標(biāo)記蛋白
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