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2024年05月23日 13:37 來源:新維創(chuàng)生物科技(重慶)有限公司
多糖類化合物的熒光標(biāo)記主要依賴于熒光染料與多糖分子之間的相互作用,以實(shí)現(xiàn)對(duì)多糖分子的可視化標(biāo)記與追蹤。以下是幾種常見的多糖類化合物熒光標(biāo)記方法:
直接標(biāo)記:直接將熒光染料與多糖分子結(jié)合,通常使用共價(jià)交聯(lián)的方法,如酯鍵或α-糖苷鍵,將熒光染料與多糖分子之間形成化學(xué)鍵。這種方法簡單、靈敏度較高,但對(duì)多糖樣品要求較高,必須保持多糖樣品的完整性和生物活性。
間接標(biāo)記:在多糖上引入適當(dāng)?shù)墓倌芑鶊F(tuán),再以這些基團(tuán)為連接點(diǎn),通過與熒光染料預(yù)先反應(yīng)或標(biāo)記分子預(yù)處理后反應(yīng),間接地將熒光染料引入到多糖分子中。常用的方法是引入胺基化基團(tuán),如葡萄糖胺化、共價(jià)表面包容等。通過與具有預(yù)先標(biāo)記的試劑發(fā)生反應(yīng),將熒光染料引入到多糖分子中,從而實(shí)現(xiàn)熒光標(biāo)記多糖的目的。
生物素化標(biāo)記:通過引入適當(dāng)?shù)墓倌芑鶊F(tuán),使多糖分子表面顯示生物素化基團(tuán)。然后,將生物素化的多糖與標(biāo)記有熒光的親合劑(通常為熒光標(biāo)記的親生素)反應(yīng),從而實(shí)現(xiàn)對(duì)多糖的標(biāo)記與追蹤。
在具體操作時(shí),常用的熒光標(biāo)記染料有FITC、CY5、CY7等,這些染料可以與多糖分子中的官能團(tuán)(如羥基、羧基等)共價(jià)連接,形成穩(wěn)定的熒光標(biāo)記多糖。另外,非共價(jià)結(jié)合法也是一種常用的熒光標(biāo)記方法,它通過熒光染料與多糖分子之間的物理相互作用(如靜電吸引、疏水作用等)實(shí)現(xiàn)熒光標(biāo)記。這種方法操作簡便,對(duì)多糖的生物學(xué)活性影響較小,但熒光染料與多糖的結(jié)合可能不夠穩(wěn)定,容易受到環(huán)境條件的影響。
脂溶性-CY5-羧基 CY5-COOH 1032678-07-1
水溶性-CY5-羧基 Sulfo-CY5-COOH 146368-11-8
脂溶性-CY5-氨基 CY5-NH2 1807529-70-9
水溶性-CY5-氨基 Sulfo-CY5-NH2 2183440-44-8
脂溶性-CY5-活性酯 CY5-NHS 1032678-42-4
水溶性-CY5-活性酯 Sulfo-CY5-NHS 2230212-27-6
脂溶性-CY5-馬來酰亞胺 CY5-MAL 1437796-65-0
水溶性-CY5-馬來酰亞胺 Sulfo-CY5-MAL 2242791-82-6
脂溶性-CY5-疊氮 CY5-N3 1782950-80-4
水溶性-CY5-疊氮 Sulfo-CY5-N3 1481447-40-8
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