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2024年06月03日 14:09 來源：http://www.yctengfei.cn/
CY5.5馬來酰亞胺CY5.5- Maleimide 的標記方法巰基反應(yīng)染料
Cy5.5 Maleimide的標記方法主要涉及到與含有巰基的生物大分子（如蛋白質(zhì)和肽）的特異性共價結(jié)合。
1. 蛋白質(zhì)標記方法
巰基反應(yīng)：
原理：Cy5.5 Maleimide中的馬來酰亞胺與蛋白質(zhì)中的游離巰基(-SH)發(fā)生反應(yīng)，形成穩(wěn)定的共價結(jié)合。
操作：將Cy5.5 Maleimide與含有游離巰基的蛋白質(zhì)混合，允許其反應(yīng)。
列寧試劑反應(yīng)（若蛋白質(zhì)中的巰基被二硫鍵遮蔽）：
原理：首先使用列寧試劑（如DTT）還原蛋白質(zhì)中的二硫鍵，暴露出游離的巰基，隨后Cy5.5 Maleimide與這些巰基反應(yīng)。
操作：先用列寧試劑處理蛋白質(zhì)，然后與Cy5.5 Maleimide反應(yīng)。
2. 細胞標記方法
活細胞表面標記：
原理：在細胞表面引入具有巰基官能團的標簽分子（如小分子探針或抗體），然后Cy5.5 Maleimide與這些巰基反應(yīng)。
操作：先使用帶有巰基的標簽分子標記細胞，隨后加入Cy5.5 Maleimide進行反應(yīng)。
細胞穿透標記：
原理：將Cy5.5 Maleimide直接添加到細胞培養(yǎng)基中，允許其穿透細胞膜并與細胞內(nèi)的巰基反應(yīng)。
操作：簡單地將Cy5.5 Maleimide加入細胞培養(yǎng)基中，進行孵育。
細胞內(nèi)標記：
原理：通過細胞穿孔方法或適當?shù)妮d體將Cy5.5 Maleimide引入細胞內(nèi)，使其與細胞內(nèi)的巰基反應(yīng)。
操作：使用特定的細胞穿孔方法或載體，將Cy5.5 Maleimide引入細胞內(nèi)部。
注意事項
反應(yīng)條件：選擇適當?shù)姆磻?yīng)條件和濃度，以確保Cy5.5 Maleimide與目標生物分子的特異性結(jié)合，避免非特異性結(jié)合和背景熒光。
驗證效果：反應(yīng)后，可以通過凝膠電泳或其他分析方法驗證標記的效果，并確保熒光染料的穩(wěn)定性和活性。
脂溶性-CY5.5-羧基 CY5.5-COOH 1144107-80-1
水溶性-CY5.5-羧基 sulfo-CY5.5-COOH 2183440-68-6
脂溶性-CY5.5-氨基 CY5.5-NH2 2097714-45-7
水溶性-CY5.5-氨基 sulfo-CY5.5-NH2 2143449-51-6
脂溶性-CY5.5-炔基 CY5.5-Alkyne 1628790-37-3
脂溶性-CY5.5-活性酯 CY5.5-NHS 1469277-96-0
脂溶性-CY5.5-馬來酰亞胺 CY5.5-MAL 1593644-50-8
水溶性CY5.5-N3 Sulfo-CY5.5-N3 2382994-65-0
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