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2024年06月03日 14:09 來源:http://www.yctengfei.cn/
CY5.5馬來酰亞胺CY5.5- Maleimide 的標記方法巰基反應(yīng)染料
Cy5.5 Maleimide的標記方法主要涉及到與含有巰基的生物大分子(如蛋白質(zhì)和肽)的特異性共價結(jié)合。
1. 蛋白質(zhì)標記方法
巰基反應(yīng):
原理:Cy5.5 Maleimide中的馬來酰亞胺與蛋白質(zhì)中的游離巰基(-SH)發(fā)生反應(yīng),形成穩(wěn)定的共價結(jié)合。
操作:將Cy5.5 Maleimide與含有游離巰基的蛋白質(zhì)混合,允許其反應(yīng)。
列寧試劑反應(yīng)(若蛋白質(zhì)中的巰基被二硫鍵遮蔽):
原理:首先使用列寧試劑(如DTT)還原蛋白質(zhì)中的二硫鍵,暴露出游離的巰基,隨后Cy5.5 Maleimide與這些巰基反應(yīng)。
操作:先用列寧試劑處理蛋白質(zhì),然后與Cy5.5 Maleimide反應(yīng)。
2. 細胞標記方法
活細胞表面標記:
原理:在細胞表面引入具有巰基官能團的標簽分子(如小分子探針或抗體),然后Cy5.5 Maleimide與這些巰基反應(yīng)。
操作:先使用帶有巰基的標簽分子標記細胞,隨后加入Cy5.5 Maleimide進行反應(yīng)。
細胞穿透標記:
原理:將Cy5.5 Maleimide直接添加到細胞培養(yǎng)基中,允許其穿透細胞膜并與細胞內(nèi)的巰基反應(yīng)。
操作:簡單地將Cy5.5 Maleimide加入細胞培養(yǎng)基中,進行孵育。
細胞內(nèi)標記:
原理:通過細胞穿孔方法或適當?shù)妮d體將Cy5.5 Maleimide引入細胞內(nèi),使其與細胞內(nèi)的巰基反應(yīng)。
操作:使用特定的細胞穿孔方法或載體,將Cy5.5 Maleimide引入細胞內(nèi)部。
注意事項
反應(yīng)條件:選擇適當?shù)姆磻?yīng)條件和濃度,以確保Cy5.5 Maleimide與目標生物分子的特異性結(jié)合,避免非特異性結(jié)合和背景熒光。
驗證效果:反應(yīng)后,可以通過凝膠電泳或其他分析方法驗證標記的效果,并確保熒光染料的穩(wěn)定性和活性。
脂溶性-CY5.5-羧基 CY5.5-COOH 1144107-80-1
水溶性-CY5.5-羧基 sulfo-CY5.5-COOH 2183440-68-6
脂溶性-CY5.5-氨基 CY5.5-NH2 2097714-45-7
水溶性-CY5.5-氨基 sulfo-CY5.5-NH2 2143449-51-6
脂溶性-CY5.5-炔基 CY5.5-Alkyne 1628790-37-3
脂溶性-CY5.5-活性酯 CY5.5-NHS 1469277-96-0
脂溶性-CY5.5-馬來酰亞胺 CY5.5-MAL 1593644-50-8
水溶性CY5.5-N3 Sulfo-CY5.5-N3 2382994-65-0
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