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2024年06月03日 14:25 來(lái)源:http://www.yctengfei.cn/
花菁染料CY5-SH的使用方法主要涉及其作為熒光探針在標(biāo)記生物分子方面的應(yīng)用。以下是關(guān)于其使用方法的詳細(xì)步驟和要點(diǎn):
準(zhǔn)備階段:
確保實(shí)驗(yàn)環(huán)境干凈,避免污染。
準(zhǔn)備所需的試劑和溶液,如CY5-SH染料、生物分子溶液(如肽、蛋白質(zhì)、寡核苷酸等)、緩沖液等。
檢查CY5-SH染料的純度和穩(wěn)定性,確保其適用于實(shí)驗(yàn)。
溶解與稀釋?zhuān)?/p>
將CY5-SH染料溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲?,如DMSO或DMF。注意避免使用強(qiáng)酸、強(qiáng)堿或高溫條件,以免影響其熒光性能。
根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要,將染料溶液稀釋至合適的濃度。
生物分子標(biāo)記:
將生物分子溶液與稀釋后的CY5-SH染料溶液混合,確?;旌暇鶆?。
在適當(dāng)?shù)臏囟群蚿H條件下,讓生物分子與CY5-SH染料反應(yīng)一定時(shí)間,使硫醇基團(tuán)(-SH)與生物分子的氨基基團(tuán)發(fā)生共價(jià)連接。
反應(yīng)結(jié)束后,通過(guò)離心、過(guò)濾或透析等方法去除未反應(yīng)的染料和雜質(zhì)。
后續(xù)處理:
對(duì)標(biāo)記后的生物分子進(jìn)行必要的純化步驟,以提高其純度和穩(wěn)定性。
對(duì)標(biāo)記效果進(jìn)行檢測(cè)和驗(yàn)證,如通過(guò)熒光光譜儀檢測(cè)熒光強(qiáng)度、通過(guò)凝膠電泳或質(zhì)譜分析確認(rèn)標(biāo)記效果等。
注意事項(xiàng):
在使用CY5-SH染料時(shí),要遵循安全操作規(guī)程,避免直接接觸皮膚和眼睛。
在儲(chǔ)存和運(yùn)輸過(guò)程中,要確保染料避光、干燥、陰涼通風(fēng)。
注意染料的有效期和穩(wěn)定性,避免使用過(guò)期或變質(zhì)的染料。
應(yīng)用示例:
CY5-SH染料可用于基因表達(dá)分析中的DNA/RNA探針標(biāo)記。例如,在芯片分析中,可以將CY5-SH標(biāo)記在cDNA探針上,用于檢測(cè)特定基因的表達(dá)水平。
在原位雜交實(shí)驗(yàn)中,CY5-SH染料也可用于DNA/RNA探針的標(biāo)記,以檢測(cè)特定基因或RNA序列在組織切片中的表達(dá)位置。
此外,CY5-SH染料還可用于環(huán)境微生物檢測(cè)中的DNA/RNA探針標(biāo)記,用于檢測(cè)目標(biāo)微生物的存在和數(shù)量。
以上僅供參考
脂溶性-CY5.5-羧基 CY5.5-COOH 1144107-80-1
水溶性-CY5.5-羧基 sulfo-CY5.5-COOH 2183440-68-6
脂溶性-CY5.5-氨基 CY5.5-NH2 2097714-45-7
水溶性-CY5.5-氨基 sulfo-CY5.5-NH2 2143449-51-6
脂溶性-CY5.5-炔基 CY5.5-Alkyne 1628790-37-3
脂溶性-CY5.5-活性酯 CY5.5-NHS 1469277-96-0
脂溶性-CY5.5-馬來(lái)酰亞胺 CY5.5-MAL 1593644-50-8
水溶性CY5.5-N3 Sulfo-CY5.5-N3 2382994-65-0
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