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2024年06月20日 10:48 來(lái)源:http://www.yctengfei.cn/
在使用CY3.5-NHS標(biāo)記蛋白時(shí),需要注意以下事項(xiàng)以確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性:
避免高溫和潮濕:
CY3.5-NHS是一種對(duì)光和濕度敏感的化合物,因此應(yīng)存放在干燥、陰涼、避光的地方。
避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在高溫和潮濕的環(huán)境中,以免影響其穩(wěn)定性和活性。
避免與氧化劑接觸:
CY3.5-NHS是一種還原性化合物,與氧化劑接觸會(huì)引發(fā)化學(xué)反應(yīng),導(dǎo)致試劑失效。
在存儲(chǔ)和取用過(guò)程中,應(yīng)避免與氧化劑、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿等化學(xué)物質(zhì)接觸。
選擇合適的反應(yīng)條件:
反應(yīng)需要在適當(dāng)?shù)膒H值下進(jìn)行,通常是在pH 7.0-9.0之間。
由于CY3.5-NHS脂溶性的優(yōu)點(diǎn),它可以在水相和有機(jī)相之間進(jìn)行反應(yīng),但需要注意選擇合適的溶劑和反應(yīng)體系。
標(biāo)記反應(yīng)不要放在強(qiáng)光下,因?yàn)榇蟛糠譄晒饣衔镌趶?qiáng)光下長(zhǎng)時(shí)間照射會(huì)緩慢光漂泊(photobleaching)。
純化標(biāo)記產(chǎn)物:
如果需要,可以通過(guò)透析或?qū)游龅确椒▽?duì)標(biāo)記產(chǎn)物進(jìn)行純化,以去除未反應(yīng)的試劑和雜質(zhì)。
評(píng)估生物分子的活性:
NHS標(biāo)記可能會(huì)影響生物分子的活性,因此在使用前需要進(jìn)行活性評(píng)估。
使用不含氨基的緩沖體系:
標(biāo)記時(shí)使用不含氨基的緩沖體系,比如磷酸鈉緩沖液(PBS)、Hepes緩沖液、碳酸氫鈉緩沖液或硼酸緩沖液等。
不要使用任何含伯胺或仲胺的緩沖液,如Tris、甘氨酸等,它們會(huì)和CY3.5上的伯胺競(jìng)爭(zhēng)。
注意高濃度咪唑的影響:
高濃度咪唑(imidazole)也會(huì)影響反應(yīng),因此在實(shí)驗(yàn)中需要避免使用高濃度的咪唑。
反應(yīng)時(shí)間的控制:
反應(yīng)時(shí)間需要控制得當(dāng),以確保反應(yīng)充分進(jìn)行但不過(guò)度,從而避免產(chǎn)物的降解或副反應(yīng)的發(fā)生。
遵循以上注意事項(xiàng),可以確保CY3.5-NHS標(biāo)記蛋白實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。
脂溶性-CY5.5-羧基 CY5.5-COOH
水溶性-CY5.5-羧基 sulfo-CY5.5-COOH
脂溶性-CY5.5-氨基 CY5.5-NH2
水溶性-CY5.5-氨基 sulfo-CY5.5-NH2
脂溶性-CY5.5-炔基 CY5.5-Alkyne
水溶性-CY5.5-炔基 Sulfo-CY5.5-Alkyne
脂溶性-CY5.5-活性酯 CY5.5-NHS
水溶性-CY5.5-活性酯 Sulfo-CY5.5-NHS
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