關(guān)注我們,為您提供時(shí)實(shí)資訊
2023年09月02日 16:11 來(lái)源:新維創(chuàng)生物科技(重慶)有限公司
FITC標(biāo)記抗體的應(yīng)用
FITC標(biāo)記抗體是將FITC與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,F(xiàn)ITC(異硫氰酸熒光素)能與各種抗體蛋白結(jié)合,結(jié)合后的抗體不喪失與一定抗原結(jié)合的特異性,其應(yīng)用范圍非常廣泛,結(jié)果即時(shí)可見、敏感性高。
FITC標(biāo)記抗體的原理
FITC異硫氰酸熒光素是一種常用的標(biāo)記抗體的方法。FITC一般為黃色。棕色或棕色粉末或結(jié)晶,在低溫下可保存數(shù)年。在堿性條件下,F(xiàn)ITC的碳酰胺鍵可與抗體蛋白上的賴氨酸氨基結(jié)合,形成FITC-蛋白質(zhì)結(jié)合物,即熒光抗體或熒光結(jié)合物??贵w分子最多可標(biāo)記15~20個(gè)FITC分子。標(biāo)記的抗體仍能保持與相應(yīng)抗原結(jié)合的能力,在熒光源紫外線或藍(lán)紫光的刺激下產(chǎn)生黃綠色熒光,通過(guò)熒光顯微鏡觀察或使用流細(xì)胞儀進(jìn)行分析,從而定性、定位或定量抗原。
FITC標(biāo)記抗體實(shí)驗(yàn)流程
(1)用500ml FITC標(biāo)記緩沖液在4℃透析純化的單抗,共2d。期間更換2或3次緩沖液(通常情況下,5ml的1-2mg/ml的抗體可以用500ml緩沖液)。在A280處檢測(cè)吸光度,確定抗體濃度(=A280×0.74×稀釋倍數(shù))。
(2)每毫克抗體加入20微升的5mg/ml FITC。室溫孵育2h。
(3)用透析液透析去除未結(jié)合的FITC,共2d。期間更換2或3次緩沖液。或者過(guò)Sephadex G-25去除。
(4)用透析液稀釋FITC-lgG復(fù)合物,使A280<2.0。在A280和A492處檢測(cè)吸光度,計(jì)算蛋白質(zhì)濃度。
蛋白質(zhì)(mg/ml)=A280-(A492×0.35)/1.4(FITC標(biāo)記抗體摩爾系數(shù)的倒數(shù))
日期:2023-09-02
FITC-COOH的特點(diǎn)和應(yīng)用
日期:2023-09-02
熒光染料FITC-NHS有那些特點(diǎn)?異硫氰酸熒光素修飾活性酯,活性基團(tuán)標(biāo)記
新維創(chuàng)生物科技(重慶)有限公司
2023.06.05
Mannose-CY5甘露糖紅色熒光標(biāo)記多糖類化合物
2024.06.12
FITC-甘露糖Mannose-FITC異硫氰酸熒光素甘露糖熒光標(biāo)記的優(yōu)點(diǎn)
2024.05.28
DBCO-CY5與DBCO-CY7化學(xué)結(jié)構(gòu)及性質(zhì)差別/sulfo-cy5-dbco/sulfo-cy7-dbco
2024.05.27
DBCO-CY5熒光標(biāo)記化合物點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)的特性CY5-二苯并環(huán)辛炔2182601-71-2
2024.05.27
Cy5標(biāo)記膽固醇在生物醫(yī)學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用領(lǐng)域醇Cholesterol-Cy5
2024.05.23
近紅外熒光染料CY5標(biāo)記膽固醇Cholesterol-Cy5針化合物
2024.05.23
Cholesterol-CY5膽固醇紅色而熒光標(biāo)記甾醇CY5羧基1032678-07-1
2024.05.23
新維創(chuàng)生物(重慶)有限公司 FITC-絲素蛋白綠色熒光標(biāo)記,Silk fibroin,CAS:96690-41-4 ,Silk fibroin-FITC…
2024.05.18
重慶新維創(chuàng)生物 CY5-MAL馬來(lái)酰亞胺的光學(xué)性質(zhì)CY5紅色熒光染料修飾1437796-65-0
2024.05.18
磺酸基CY5馬來(lái)酰亞胺巰基反應(yīng)性熒光染料Sulfo-CY5-MAL
2024.05.13
Sulfo-CY5-MAL︱2242791-82-6︱磺酸基團(tuán)熒光染料衍生物在生物成像、化學(xué)分析的應(yīng)用…
2024.05.13
阿霉素?zé)晒庑揎桼B-Doxorubicin羅丹明標(biāo)記阿霉素藥物輸送體內(nèi)示蹤
2024.05.11
賴氨酸FITC標(biāo)記FITC-D-LYS熒光素標(biāo)記賴氨酸綠色熒光異硫氰酸熒光素生物學(xué)應(yīng)用…
2024.05.11
D-LYS-FITC熒光素標(biāo)記賴氨酸 多肽標(biāo)記綠色熒光異硫氰酸熒光素的應(yīng)用
2024.05.11
FITC-D-LYS熒光素標(biāo)記賴氨酸綠色熒光異硫氰酸熒光素修飾多肽
2024.05.11
CY5-amine/Cy5-NH2/氨基CY5的熒光特性1807529-70-9 Sulfo-CY5-amine磺酸基
2024.05.10
CY5-amine/Cy5-NH2/氨基CY5的化學(xué)性質(zhì)近紅外熒光染料CY5-NH2 1807529-70-9
2024.05.10
水溶性花菁染料Cy5標(biāo)記鏈霉親和素streptavidin
2023.11.24
水溶性CY5標(biāo)記疊氮的原理
2023.11.24
熒光探針Sulfo-CY5-azide水溶性疊氮化物
2023.11.24
在氫譜中氨基為什么有兩個(gè)峰?
2023.07.13
新維創(chuàng)生物匯總HNMR(核磁氫譜)化學(xué)位移0-14代表性官能團(tuán)
2023.07.07
常用于核磁共振的氘代化學(xué)品
2023.07.03
NMR所需樣品量和內(nèi)標(biāo)總結(jié)
2023.06.28
什么是核磁共振二維譜(2D NMR)?
2023.06.27
新維創(chuàng)生物利用核磁共振波譜儀分析聚合物結(jié)構(gòu)
2023.06.27
你知道固體核磁和液體和磁的區(qū)別嗎?
2023.06.20