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2023年09月05日 10:38 來(lái)源：新維創(chuàng)生物科技（重慶）有限公司
Cyanine5-NHS/CY5-SE 蛋白質(zhì)相互作用研究
Cyanine5-NHS (CY5-NHS) ester是一種熒光染料，NHS表示其具有N-羥基琥珀酰亞胺酯活性基團(tuán)。CY5-NHS ester可以用于蛋白質(zhì)相互作用研究，特別是用于熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）等技術(shù)，以揭示蛋白質(zhì)間的相互作用和結(jié)合事件。
蛋白質(zhì)相互作用研究中使用CY5-NHS ester的常見(jiàn)步驟包括：
1、蛋白質(zhì)標(biāo)記：
首先，將CY5-NHS ester與目標(biāo)蛋白質(zhì)共偶聯(lián)，通常是在堿性條件下將CY5-NHS ester與蛋白質(zhì)中的氨基（-NH2）基團(tuán)發(fā)生反應(yīng)，形成共價(jià)鍵連接。這樣可以實(shí)現(xiàn)CY5-NHS ester的共價(jià)標(biāo)記，并將熒光染料引入到蛋白質(zhì)分子中。
2、熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）：
CY5-NHS ester標(biāo)記的蛋白質(zhì)可以與另一種熒光標(biāo)記蛋白質(zhì)（通常是另一種激發(fā)波長(zhǎng)的熒光染料標(biāo)記的蛋白質(zhì)）進(jìn)行相互作用研究。在FRET技術(shù)中，當(dāng)兩個(gè)標(biāo)記蛋白質(zhì)相互接近并存在重疊的熒光光譜區(qū)域時(shí)，通過(guò)能量轉(zhuǎn)移過(guò)程，一個(gè)熒光染料的激發(fā)能量傳遞給另一個(gè)染料，導(dǎo)致另一個(gè)染料發(fā)射熒光。這種FRET信號(hào)可以用來(lái)定量分析蛋白質(zhì)之間的結(jié)合強(qiáng)度和相互作用距離，從而揭示蛋白質(zhì)相互作用的特性。
蛋白質(zhì)相互作用研究中使用CY5-NHS ester的優(yōu)勢(shì)：
1、CY5-NHS ester的共價(jià)標(biāo)記可確保熒光染料牢固地連接到蛋白質(zhì)上，避免染料的游離和漂洗步驟中的丟失。
2、CY5-NHS ester具有較高的熒光量子產(chǎn)率和光穩(wěn)定性，適用于長(zhǎng)時(shí)間的實(shí)驗(yàn)和高靈敏度的檢測(cè)。
3、CY5-NHS ester標(biāo)記的蛋白質(zhì)可以與其他熒光標(biāo)記蛋白質(zhì)進(jìn)行多色共振能量轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)，實(shí)現(xiàn)多個(gè)相互作用事件的同時(shí)監(jiān)測(cè)。
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