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2024年07月10日 10:13 來源：http://www.yctengfei.cn/
1、透析抗體
吸取2mg抗體到透析袋中，將抗體濃度調(diào)整為（4mg/mL），在20 mM的碳酸鹽緩沖液（pH=9.5）中透析3h，每 1h 換液一次。如果原抗體中含有Tris、NH4+等游離氨基的試劑，必須透析除去。
2、氧化HRP
稱量4mg HRP溶于0.2ml水中(20 mg/ml),稱量 Nai04 37.9mg 溶于1.895ml 水中(20mg/ml)，HRP與 Nai04體積比 1:1 混合 (即各取200ul 混合，緩慢攪拌)，4 ℃避光靜置反應(yīng)30min，此時溶液為綠色。
3、終止氧化
加4ul乙二醇到40ul水中，混后全部加入氧化好的HRP中（緩慢攪拌）。4℃避光靜置反應(yīng)30min，此時溶液為褐色。
4、標(biāo)記抗體
將終止氧化的 HRP溶液直接加入到透析好的抗體中混勻， 4 ℃避光反應(yīng)4h。
5、終止標(biāo)記
稱取0.2mg的NaHB4，溶解于40 ul水中（現(xiàn)配現(xiàn)用），全部加入上述反應(yīng)液中，4℃避光反應(yīng)1h，每10min 搖一次。
6、純化保存
20 mM PBS（pH=7.4）4℃避光透析過夜。然后在標(biāo)記液中加入等體積的甘油，混勻后-20℃保存。純化抗體-HRP標(biāo)記物，也可選擇 酶標(biāo)純化劑 進(jìn)行純化。經(jīng)過驗證通過酶標(biāo)純化劑 純化，標(biāo)記物測試性能更好，且純化時間僅需要半個小時，當(dāng)天完成標(biāo)記操作，避免過夜透析純化。詳情可在公眾號主頁發(fā)送 酶標(biāo)純化劑進(jìn)行了解。
HPR-Alkyne 辣根過氧化物酶-炔基
HPR-CHO 辣根過氧化物酶-醛基
HPE-NHS 辣根過氧化物酶-活化酯
HPR-Streptavidin 辣根過氧化物酶-鏈霉親和素
β-Cyclodextrin-MAL β-環(huán)糊精-MAL
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