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2024年07月18日 14:55 來源：http://www.yctengfei.cn/index.php?id=341
產(chǎn)品名稱：FITC-BSA
產(chǎn)品名稱：CY5-BSA
產(chǎn)品名稱：FITC-Transferrin
產(chǎn)品名稱：CY5-Transferrin
供應商：重慶新維創(chuàng)生物
FITC（Fluorescein Isothiocyanate，異硫氰酸熒光素）是一種常用的熒光染料，廣泛應用于生物學和醫(yī)學研究中，用于標記蛋白質(zhì)以實現(xiàn)熒光標記和可視化。以下是關(guān)于FITC標記蛋白的詳細步驟和注意事項：
一、FITC標記蛋白的步驟
準備FITC溶液
將FITC熒光素粉末溶解在適當?shù)娜軇┲?，如碳酸氫鈉緩沖液（pH 9.0-9.5）或二甲基亞砜（DMSO）。
根據(jù)實驗需求和FITC熒光素的濃度選擇合適的溶解液。通常，F(xiàn)ITC會溶解在無水DMSO中配制成一定濃度的溶液，如1mg/mL。
準備蛋白質(zhì)樣品
選擇要標記的蛋白質(zhì)樣品，并確保其在標記過程中的穩(wěn)定性和活性。蛋白質(zhì)可以是純化的重組蛋白、抗體或其他含有氨基酸殘基的蛋白質(zhì)。
將蛋白質(zhì)溶解在合適的緩沖液中，如0.1M碳酸鈉緩沖液（pH 9.0），并確保蛋白質(zhì)濃度足夠高，通?！?mg/mL。
FITC偶聯(lián)反應
將FITC溶液與蛋白質(zhì)樣品混合，并在適當?shù)臈l件下進行偶聯(lián)反應。
常用的偶聯(lián)試劑是異氰酸酯（Isocyanate），通過異氰酸酯化反應將FITC與蛋白質(zhì)中的氨基酸殘基（通常是賴氨酸或組氨酸）發(fā)生反應，形成硫碳氨基鍵。
對于1mL蛋白溶液，通常加入一定量的FITC溶液（如50μL），邊加邊輕輕攪拌蛋白溶液，以促進反應均勻進行。
反應停止和純化
為了停止偶聯(lián)反應，可以加入氨基化劑（如甘氨酸）或其他適當?shù)脑噭?/p>
通過凝膠過濾、凝膠電泳、柱層析或洗滌等適當?shù)募兓襟E，去除未反應的FITC和其他雜質(zhì)。例如，通過凝膠過濾層析分離排除未被結(jié)合的FITC，分離范圍根據(jù)蛋白質(zhì)分子量而定。
驗證熒光標記
使用熒光光譜儀、熒光顯微鏡或其他熒光檢測方法，檢測和驗證標記蛋白質(zhì)的熒光性能。
通過測量熒光信號的強度和特定波長的發(fā)射光譜，可以確定FITC熒光素是否成功地與蛋白質(zhì)結(jié)合。
CY5標記丙泊酚 CY5-2,6-Diisopropylphenol
CY3標記丙泊酚 CY3-2,6-Diisopropylphenol
CY5標記丙烯酸羥乙酯 CY5-2-Hydroxyethyl acrylate
FITC標記鏈霉親和素 FITC-Streptavidin
熒光素標記牛血清白蛋白 FITC-BSA
CY5標記牛血清白蛋白 CY5-BSA
熒光素標記轉(zhuǎn)鐵蛋白 FITC-Transferrin
CY5標記轉(zhuǎn)鐵蛋白 CY5-Transferrin
熒光素纖維蛋白原（牛） FITC-Fibrinogen
CY5纖維蛋白原（牛） CY5-Fibrinogen
CY3纖維蛋白原（牛） CY5-Fibrinogen
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CY5標記溶菌酶 CY5-Lysozyme
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