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2024年12月10日 11:25 來(lái)源:新維創(chuàng)生物實(shí)驗(yàn)室
CY5-N3在標(biāo)記生物分子方面具有廣泛的應(yīng)用,其強(qiáng)烈的紅色熒光和穩(wěn)定的化學(xué)性質(zhì)使其成為生物成像、藥物篩選和細(xì)胞生物學(xué)研究中的重要工具。
一、標(biāo)記蛋白質(zhì)
CY5-N3可以與蛋白質(zhì)發(fā)生反應(yīng),通過熒光顯微鏡觀察蛋白質(zhì)在細(xì)胞或組織中的分布和動(dòng)態(tài)變化。這種標(biāo)記方法不僅保留了蛋白質(zhì)的原有結(jié)構(gòu)和功能,還賦予了它們熒光特性,便于在復(fù)雜的生物體系中進(jìn)行成像和檢測(cè)。
準(zhǔn)備蛋白質(zhì)樣品:提取或純化目標(biāo)蛋白質(zhì),并確保其在標(biāo)記前處于適當(dāng)?shù)木彌_液中。
制備反應(yīng)體系:將CY5-N3與蛋白質(zhì)樣品一起加入反應(yīng)體系中,通常需要一定的標(biāo)記劑和蛋白質(zhì)的摩爾比例。
反應(yīng)條件:進(jìn)行標(biāo)記反應(yīng),通常在室溫或4°C下進(jìn)行。反應(yīng)時(shí)間可以根據(jù)需要進(jìn)行調(diào)整。
純化和去除未反應(yīng)的熒光染料:使用柱層析或其他方法將未反應(yīng)的CY5-N3和雜質(zhì)從標(biāo)記后的蛋白質(zhì)中去除。
驗(yàn)證標(biāo)記效果:使用熒光成像或熒光分光光度法驗(yàn)證蛋白質(zhì)是否成功標(biāo)記。
二、標(biāo)記核酸(DNA和RNA)
CY5-N3同樣可以用于標(biāo)記DNA和RNA,通過熒光原位雜交(FISH)等技術(shù)研究基因表達(dá)和核酸序列定位。
準(zhǔn)備核酸樣品:提取或合成目標(biāo)DNA或RNA序列,并確保其純度和完整性。
制備反應(yīng)體系:將CY5-N3與核酸樣品一起加入反應(yīng)體系中,同樣需要一定的標(biāo)記劑和核酸的摩爾比例。
反應(yīng)條件:進(jìn)行標(biāo)記反應(yīng),通常在室溫或37°C下進(jìn)行。反應(yīng)時(shí)間也可以根據(jù)需要進(jìn)行調(diào)整。
純化和去除未反應(yīng)的熒光染料:使用柱層析或其他方法將未反應(yīng)的CY5-N3和雜質(zhì)從標(biāo)記后的核酸中去除。
驗(yàn)證標(biāo)記效果:使用熒光成像或熒光分光光度法驗(yàn)證核酸是否成功標(biāo)記。
三、應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)研究
免疫細(xì)胞化學(xué):CY5-N3標(biāo)記的抗體可以用于檢測(cè)和定位特定蛋白質(zhì)在細(xì)胞或組織中的分布,有助于研究蛋白質(zhì)的功能和相互作用。
細(xì)胞內(nèi)示蹤:標(biāo)記的生物分子可以用于追蹤其在細(xì)胞內(nèi)的運(yùn)動(dòng)和分布,研究細(xì)胞生物學(xué)過程。例如,通過標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)或核酸,可以觀察它們?cè)诩?xì)胞分裂、遷移和信號(hào)傳導(dǎo)等過程中的動(dòng)態(tài)變化。
四、應(yīng)用于高通量篩選實(shí)驗(yàn)
CY5-N3標(biāo)記的生物分子還可用于高通量篩選實(shí)驗(yàn),以尋找潛在的藥物靶點(diǎn)或候選藥物。通過熒光信號(hào)的檢測(cè)和分析,可以快速篩選出具有特定生物活性的化合物,為藥物研發(fā)提供有力支持。
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