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2023年09月15日 13:40 來(lái)源:新維創(chuàng)生物科技(重慶)有限公司
細(xì)胞免疫化學(xué)與免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)都是依據(jù)抗原抗體反應(yīng)和化學(xué)顯色的原理,采用標(biāo)記的特異性抗體對(duì)組織或細(xì)胞內(nèi)抗原的分布進(jìn)行原位檢測(cè)技術(shù)。細(xì)胞免疫化學(xué)將培養(yǎng)處理后的細(xì)胞爬片、固定、破膜、封閉后,加入一抗與抗原蛋白結(jié)合,再加入標(biāo)記有熒光素的二抗與一抗進(jìn)行反應(yīng),最后通過(guò)激光共聚焦掃描顯微鏡進(jìn)行熒光拍攝來(lái)顯示細(xì)胞中靶蛋白的表達(dá)變化和定位。
激光共聚焦掃描顯微鏡(Confoccal Laser Scanning Microscope, CLSM)是現(xiàn)在最先進(jìn)的細(xì)胞生物醫(yī)學(xué)分析儀器之一,采用激光作掃描光源,逐點(diǎn)、逐行、逐面快速掃描成像,掃描的激光與熒光收集共用一個(gè)物鏡,物鏡的焦點(diǎn)即掃描激光的聚焦點(diǎn),也是瞬間成像的物點(diǎn)。從一個(gè)點(diǎn)光源發(fā)射的探測(cè)光通過(guò)透鏡聚焦到被觀測(cè)物體上,如果物體恰在焦點(diǎn)上,那么反射光通過(guò)原透鏡應(yīng)當(dāng)匯聚回到光源,這就是所謂的共聚焦。由于激光束的波長(zhǎng)較短,光束很細(xì),所以共焦激光掃描顯微鏡有較高的分辨力,大約是普通光學(xué)顯微鏡3倍。系統(tǒng)經(jīng)一次調(diào)焦,掃描限制在樣品的一個(gè)平面內(nèi)。調(diào)焦深度不一樣時(shí),就可以獲得樣品不同深度層次的圖像,這些圖像信息都儲(chǔ)于計(jì)算機(jī)內(nèi),通過(guò)計(jì)算機(jī)分析和模擬,就能顯示細(xì)胞樣品的立體結(jié)構(gòu)。
新維創(chuàng)生物科技(重慶)有限公司
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