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2023年10月07日 13:50 來(lái)源：新維創(chuàng)生物科技（重慶）有限公司
ICG熒光染料合成步驟及注意事項(xiàng)詳解
ICG（Indocyanine Green，吲哚菁綠）是一種常見的熒光染料，其在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和光學(xué)領(lǐng)域中具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。以下是ICG熒光染料合成步驟的詳細(xì)說(shuō)明。
材料準(zhǔn)備
1. 原料：鄰二氯苯（o-dichlorobenzene）、氯化銨、對(duì)甲苯胺、多聚磷酸、醋酸、氫氧化鈉、乙醇胺、碳酸鉀和對(duì)甲酚磺酸。
2. 儀器：分液漏斗、燒瓶、冷凝器、抽濾瓶、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、層析柱、恒溫水浴鍋、分光光度計(jì)。
合成步驟
1. 鄰二氯苯與氯化銨反應(yīng)
將鄰二氯苯與氯化銨按照物質(zhì)的量比1:2混合，加入燒瓶中，在攪拌下緩慢滴加對(duì)甲苯胺和多聚磷酸。反應(yīng)溫度控制在100-110℃，反應(yīng)時(shí)間為4小時(shí)。然后加入醋酸，中和未反應(yīng)的多聚磷酸，再加入氫氧化鈉水溶液，調(diào)節(jié)pH至7-8，經(jīng)抽濾、水洗得到產(chǎn)物。
2. 產(chǎn)物重結(jié)晶
將上述產(chǎn)物在乙醇胺和碳酸鉀的作用下進(jìn)行重結(jié)晶，然后以水為溶劑進(jìn)行萃取。通過(guò)調(diào)節(jié)溫度和pH值，反復(fù)進(jìn)行結(jié)晶和萃取操作，直至獲得純度較高的產(chǎn)物。
3. 磺化反應(yīng)
將上述產(chǎn)物與對(duì)甲酚磺酸在高溫下進(jìn)行磺化反應(yīng)，控制反應(yīng)溫度在130-140℃，反應(yīng)時(shí)間4小時(shí)。然后加入水和氫氧化鈉溶液，調(diào)節(jié)pH至7-8，抽濾得到產(chǎn)物。
4. 分離和純化
將上述產(chǎn)物溶于適量的氫氧化鈉溶液中，用乙醚萃取，調(diào)節(jié)pH至7-8，抽濾得到固體產(chǎn)物。將產(chǎn)物用乙醇進(jìn)行重結(jié)晶，再次抽濾得到較純的ICG染料。最后用分光光度計(jì)測(cè)定ICG染料的純度和濃度。
注意事項(xiàng)
1. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中要嚴(yán)格控制反應(yīng)溫度和時(shí)間，避免產(chǎn)生副反應(yīng)。
2. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需佩戴防護(hù)眼鏡和手套，注意安全。
3. 使用有機(jī)溶劑時(shí)要避免明火，并在通風(fēng)良好的環(huán)境下進(jìn)行操作。
4. 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，需妥善處理廢液，遵守環(huán)保要求。
通過(guò)以上步驟，可以制備出較高純度的ICG熒光染料。這種染料在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和光學(xué)領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值，例如作為熒光探針標(biāo)記生物分子、光學(xué)成像等。
新維創(chuàng)生物科技（重慶）有限公司
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