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ICG吲哚菁綠標記生物素的應(yīng)用

2023年10月08日 17:18 來源:新維創(chuàng)生物科技(重慶)有限公司

                               ICG吲哚菁綠標記生物素的應(yīng)用
吲哚菁綠是一種具有高熒光量子產(chǎn)率的染料,其激發(fā)波長范圍廣、摩爾消光系數(shù)高、光穩(wěn)定性好以及在生理環(huán)境中水溶性佳等特點被廣泛應(yīng)用于生物成像、光學(xué)探針、生物分子標記等領(lǐng)域。
一、吲哚菁綠標記生物素的制備方法
制備吲哚菁綠標記生物素的方法有多種,其中一種簡單有效的方法是將吲哚菁綠與生物素通過化學(xué)反應(yīng)偶聯(lián)。具體步驟如下:
1. 將吲哚菁綠溶解在含有NaHCO?的堿性溶液中;
2. 加入一定量的E-64(一種蛋白酶抑制劑),以抑制吲哚菁綠發(fā)生聚合;
3. 加入N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺(EDC)的混合溶液,以激活吲哚菁綠上的活性基團;
4. 加入生物素溶液,使吲哚菁綠與生物素偶聯(lián);
5. 用醋酸鈉溶液中和,并用水透析以洗去未反應(yīng)的吲哚菁綠和生物素;
6. 最后用乙醇沉淀,得到吲哚菁綠標記生物素。
制備的吲哚菁綠標記生物素呈深綠色,具有高熒光量子產(chǎn)率、高摩爾消光系數(shù)、光穩(wěn)定性好、水溶性佳等優(yōu)點,在生物成像、光學(xué)探針、生物分子標記等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。
三、吲哚菁綠標記生物素的應(yīng)用
1. 生物成像
吲哚菁綠標記生物素可應(yīng)用于生物成像領(lǐng)域,如在熒光顯微鏡成像和共聚焦激光掃描顯微鏡成像中,可以作為熒光染料標記細胞或組由織于中吲的哚生菁物綠分具子有。高熒光量子產(chǎn)率和摩爾消光系數(shù),其在細胞和組織中的穿透深度和檢測靈敏度較高,可提高成像效果。
2. 光學(xué)探針
吲哚菁綠標記生物素還可以作為光學(xué)探針用于研究生物由分于子吲的哚結(jié)菁構(gòu)綠和的性熒質(zhì)光。性質(zhì)受到激發(fā)波長的影響較小,因此可以將其與不同的蛋白質(zhì)分子偶聯(lián),用于研究蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和動力學(xué)性質(zhì)。
3. 生物分子標記
吲哚菁綠標記生物素可以用于生物分子標記,如用于免疫分析、基因測序和蛋白質(zhì)通組過學(xué)將等吲領(lǐng)哚域菁。綠標記到特異性抗體或核酸分子上,可以提高分析的靈敏度和特異同性時。,由于吲哚菁綠的穩(wěn)定性好和光活性強等特點,其在體內(nèi)外均具有良好的穩(wěn)定性,可用于體內(nèi)跟蹤和成像。


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