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2023年10月11日 12:42 來源:新維創(chuàng)生物科技(重慶)有限公司
在免疫熒光組織化學(xué)技術(shù)中,將熒光素標(biāo)記的抗體用于檢測存在于組織或細(xì)胞培養(yǎng)物中的抗原。熒光素是一種可以吸收特定波長的光的染料,當(dāng)受到激發(fā)時,它會發(fā)出另一種波長的光。由于其發(fā)出的光可以被特殊的濾鏡和顯微鏡捕獲并可視化,因此熒光標(biāo)記的抗體可以用于定位和可視化抗原。
熒光素標(biāo)記的抗體與普通抗體相比,具有更高的特異性,并且可以在不干擾細(xì)胞或組織結(jié)構(gòu)的情況下進(jìn)行免疫定位。此外,熒光標(biāo)記抗體還具有更高的敏感性,可以檢測到組織中較低的抗原濃度。
免疫熒光組織化學(xué)的基本步驟包括固定、洗滌、孵育抗體、洗滌、以及觀察。首先,組織或細(xì)胞被固定在適當(dāng)?shù)木彌_液中,以保持其結(jié)構(gòu),并使抗體能夠穿透并識別抗原。然后,組織或細(xì)胞進(jìn)行洗滌,以去除未結(jié)合的抗體和其他雜質(zhì)。接下來,熒光素標(biāo)記的抗體被添加到組織或細(xì)胞中,與抗原進(jìn)行特異性結(jié)合。再次洗滌以去除未結(jié)合的抗體后,組織或細(xì)胞就可以用顯微鏡觀察了。
在抗原檢測中,熒光標(biāo)記抗體與特異性抗原結(jié)合,形成抗原-抗體復(fù)合物。由于復(fù)合物中的抗體是熒光標(biāo)記的,因此當(dāng)復(fù)合物形成時,就會產(chǎn)生熒光信號。熒光信號的強(qiáng)度與抗原的數(shù)量和抗體的特異性有關(guān)。由于熒光信號可以被特定波長的激發(fā)光引發(fā)并被顯微鏡捕獲,因此可以通過觀察熒光的強(qiáng)度和分布來確定抗原的位置和數(shù)量。
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