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2023年10月14日 14:51 來(lái)源：新維創(chuàng)生物科技（重慶）有限公司
熒光標(biāo)記物質(zhì)在蛋白的功能研究、藥物篩選等領(lǐng)域也有著廣泛的應(yīng)用。人們利用利用熒光標(biāo)記的多肽來(lái)檢測(cè)目標(biāo)蛋白的活性，并將其發(fā)展的高通量活性篩選方法應(yīng)用于疾病治療靶點(diǎn)蛋白的藥物篩選和藥物開(kāi)發(fā)（例如，各種激酶、磷酸酶、肽酶等）。因此，多肽的熒光修飾，同樣是多肽合成領(lǐng)域的重要內(nèi)容。
異硫氰酸熒光素（FITC）具有比較高的活性，通常來(lái)說(shuō)，在固相合成過(guò)程中引入該種熒光基團(tuán)相對(duì)于其他熒光素要更容易，并且反應(yīng)過(guò)程中不需要加入活化試劑。
FITC修飾的多肽通常主要有兩種形式：
（1）在整條肽鏈N端接入FITC，并且在FITC之前接入一分子的Acp（6-氨基己酸），也稱(chēng)烷基間隔器。反應(yīng)中FITC與肽鏈上裸露的-NH2反應(yīng)，Acp的接入提供了六個(gè)碳的直鏈空間，大大降低了反應(yīng)的空間位阻，提高了反應(yīng)效率，降低了反應(yīng)難度。其次，F(xiàn)ITC還與多肽結(jié)構(gòu)中的-SH，側(cè)鏈-NH2反應(yīng)，Acp的加入也降低了這種副反應(yīng)發(fā)生的可能。此外，多肽在酸性環(huán)境條件下切割時(shí)，在N端接入FITC的多肽需要經(jīng)歷環(huán)化作用來(lái)形成熒光素，這種過(guò)程通常都會(huì)伴隨最后一個(gè)氨基酸的切除，而烷基間隔器Acp的接入就避免了這一情況的發(fā)生。
（2）在整條肽中的某個(gè)Lys側(cè)鏈接入FITC，Lys側(cè)鏈為末端為-NH2的四碳直鏈烷基，直接起到了降低空間位阻的作用。這種修飾方式能夠靈活的在整條肽中任何位置進(jìn)行FITC修飾，而不僅僅局限于末端。
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