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2025年03月17日 11:15 來(lái)源：http://www.yctengfei.cn/
中文名稱：花菁染料CY3鏈霉親和素
英文名稱：Cy3-Streptavidin（Cy3-SA）
外觀與劑型
凍干粉末：呈橙紅色疏松狀固體，復(fù)溶后溶液呈澄清透明橙紅色，無(wú)可見(jiàn)沉淀。
溶解性：易溶于磷酸鹽緩沖液（PBS）或Tris緩沖液（pH 7.2-8.0），溶解度>5 mg/mL，無(wú)需有機(jī)溶劑輔助。
光譜特性
熒光參數(shù)：Cy3的最大吸收波長(zhǎng)550 nm，發(fā)射波長(zhǎng)570 nm，消光系數(shù)（ε）為150,000 M?1cm?1，量子產(chǎn)率約0.15。
光穩(wěn)定性：在持續(xù)光照下（功率密度10 mW/cm2），熒光半衰期約1200秒，優(yōu)于FITC等染料。
分子結(jié)構(gòu)與組裝
四聚體結(jié)構(gòu)：鏈霉親和素（SA）以四聚體形式存在，每個(gè)亞基含一個(gè)生物素結(jié)合位點(diǎn)，Cy3標(biāo)記后分子量約60 kDa（單體）+ 670 Da（Cy3）。
標(biāo)記位點(diǎn)：Cy3通過(guò)賴氨酸殘基的ε-氨基與SA共價(jià)連接，標(biāo)記比通常為1-3個(gè)Cy3/SA四聚體。
穩(wěn)定性與儲(chǔ)存
溫度敏感性：4℃儲(chǔ)存穩(wěn)定6個(gè)月，-20℃可保存2年以上；反復(fù)凍融不超過(guò)5次。
pH適應(yīng)性：在pH 6-9范圍內(nèi)穩(wěn)定，極端pH（<5或>10）可能導(dǎo)致Cy3輕微脫落或蛋白變性。
生物素結(jié)合能力
親和力：Cy3標(biāo)記不改變SA對(duì)生物素的結(jié)合常數(shù)（Kd≈10?1? M），可形成穩(wěn)定復(fù)合物。
結(jié)合容量：每mol Cy3-SA可結(jié)合4 mol生物素化分子（如抗體或核酸），無(wú)顯著空間位阻。
熒光各向異性
旋轉(zhuǎn)特性：Cy3-SA的熒光各向異性值（r）約為0.25，反映其在溶液中的較大分子量與緩慢旋轉(zhuǎn)。
膠體行為
粒徑分布：動(dòng)態(tài)光散射（DLS）顯示Cy3-SA水合粒徑約5-8 nm，多分散指數(shù)（PDI）<0.2。
表面電荷
Zeta電位：在生理?xiàng)l件下（pH 7.4）帶負(fù)電（-5至-15 mV），可通過(guò)靜電作用與帶正電的納米材料結(jié)合。
紫外-可見(jiàn)光譜：監(jiān)測(cè)280 nm（蛋白）和550 nm（Cy3）吸收峰，計(jì)算標(biāo)記比。
熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）：與生物素化熒光受體（如Cy5-Biotin）構(gòu)建FRET對(duì)，驗(yàn)證結(jié)合效率。
圓二色光譜（CD）：分析二級(jí)結(jié)構(gòu)，確認(rèn)標(biāo)記后β-折疊含量保持>80%。
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