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2023年11月20日 13:31 來(lái)源:新維創(chuàng)生物科技(重慶)有限公司
熒光染料標(biāo)記蛋白或多肽技術(shù)是常見(jiàn)的蛋白體外標(biāo)記技術(shù),除了GFP等融合表達(dá)熒光蛋白之外,目標(biāo)蛋白經(jīng)過(guò)熒光染料標(biāo)記可以直接進(jìn)行活體示蹤、細(xì)胞分選等下游實(shí)驗(yàn)操作。
原理:熒光標(biāo)記所依賴(lài)的化合物稱(chēng)為熒光物質(zhì)。熒光物質(zhì)是指具有共軛雙鍵體系化學(xué)結(jié)構(gòu)的化合物,受到紫外光或藍(lán)紫光照射時(shí),可激發(fā)成為激發(fā)態(tài),當(dāng)從激發(fā)態(tài)恢復(fù)基態(tài)時(shí),發(fā)出熒光。蛋白熒光標(biāo)記技術(shù)利用熒光物質(zhì)共價(jià)結(jié)合在目標(biāo)分子的某個(gè)基團(tuán)上,利用它的熒光特性來(lái)提供被研究對(duì)象的信息。
應(yīng)用和特點(diǎn):活化的熒光染料,例如FITC、7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)、羅丹明B(Rhodamine B)或Alexa Fluor染料等,可用于標(biāo)記抗體或蛋白功能基團(tuán),生成分子探針并通過(guò)熒光成像進(jìn)行檢測(cè)。當(dāng)用熒光染料化學(xué)標(biāo)記特異性抗體或其他純化的生物分子時(shí),它們成為用于檢測(cè)靶抗原或相互作用配偶體的熒光探針,應(yīng)用于細(xì)胞成像、流式細(xì)胞術(shù)、蛋白質(zhì)印跡和酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)。因?yàn)闊晒鈽?biāo)記物具有無(wú)放射物污染、操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn),使其在蛋白功能研究、藥物篩選等許多研究領(lǐng)域的應(yīng)用日趨廣泛。
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