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2024年01月03日 09:49 來源:新維創(chuàng)生物科技(重慶)有限公司
花青素用于多種生物學(xué)應(yīng)用,包括比較基因組雜交和基因芯片等。 根據(jù)結(jié)構(gòu),它們覆蓋可見光譜和紅外波長。Cy3,Cy5和Cy7是流行的花青染料,特別是Cy3和Cy5通常用于2種顏色檢測。Cy3染料發(fā)黃綠色熒光(ex / em = ~550 / 570),而Cy5在紅色區(qū)域發(fā)熒光(ex / em = ~650 / 670nm)。這種非磺化花青不溶于水,主要用于標(biāo)記寡核苷酸,肽和其他小分子。
Cy系列熒光染料包含兩種異構(gòu)體的形式,一種是非磺化花青素(non-sulfonated cyanines),一種是磺化花青素(sulfonated cyanine)。
非磺化Cy染料的水溶性通常比較低。在標(biāo)記生物分子時,常常需要加入有機溶液(一般是DMF或DMSO)。常規(guī)操作是將染料先溶于有機溶劑中,然后按比例加入到生物分子的水溶液中反應(yīng)。反應(yīng)完成后離心除去沉淀的染料,再透析除去未反應(yīng)的染料小分子。非磺化Cy染料易溶于氯仿,甲醇,THF,乙腈等常規(guī)有機溶劑,適用于有機合成反應(yīng)。因此,非磺化Cy染料可以直接在有機溶劑中與有機小分子反應(yīng),標(biāo)記小分子或者高分子材料。
磺化Cy染料在其發(fā)色團(tuán)上各有兩個硫酸離子官能團(tuán),所以這類染料具有非常好的水溶性。在對樣品水溶性要求較高時,磺化Cy染料是更好的選擇?;腔?,Cy染料的熒光譜圖發(fā)生了非常小的藍(lán)移,這是一個非常普遍的現(xiàn)象,藍(lán)移后激發(fā)峰和發(fā)射峰仍在儀器的檢測范圍之內(nèi),所以不必更改儀器參數(shù)。
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