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2024年01月03日 09:58 來源:新維創(chuàng)生物科技(重慶)有限公司
CY 為花菁 (Cyanine) 的縮寫,經典的菁染料含有兩個含氮雜環(huán),分子內部含有由甲川基 (CH)n 組成的共軛鏈,n 可為奇數或偶數。吸光度和熒光波長可通過選擇聚次甲基橋的長度來控制:越長的花菁素具有越高的吸光度和發(fā)射波長 根據鏈中的碳原子數,菁類由甲川基被分為一甲基 (CY1,n=0)、三甲基 (CY3,n=1)、五甲基 (CY5,n=2) 和七甲基 (CY7,n=3)。
CY 染料分為非磺化花菁和磺化花菁
兩者的光譜特性基本相同,在 DNA 和蛋白質的標記中,它們是可互換的,兩種均可用于標記生物分子。磺化花菁染料具體水溶性,且不易在水中聚集,是抗體和蛋白標記的首選。
CY 活化基團的選擇
根據需要標記的生物分子的可標記基團 (胺基、醛基或巰基) 以及酸堿性,選擇相應的活化染料和反應條件。為減少空間位阻影響,
CY 花菁類染料優(yōu)點
1) 光譜窄,信號強
2) 花菁類染料的摩爾吸光系數高于其他熒光染料
3) 磺化花菁類染料易溶于水,對組織細胞毒性小,適用于動物和細胞實驗
4) 熒光波段在近紅外區(qū)段的組織透過性更好。
CY 花菁類染料使用方法
以 NHS 活化脂 CY 標記蛋白為例
1) 將蛋白溶液與配置好的染料工作液倒入反應溶劑中
2) 用移液器上下輕打混勻
3) 常溫下靜置或輕微混動反應 3-5 個小時 (可過夜)
4) 反應結束后進行透析除去未標記染料
5) 避光放置在 4°C 保存。
日期:2024-01-03
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