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2024年01月04日 14:09 來源:新維創(chuàng)生物科技(重慶)有限公司
藻紅蛋白(PE)標(biāo)記抗體熒光蛋白修飾11016-17-4
巰基化藻紅蛋白(PE)的制備
1、將600μL濃度為15.5mg/ml的鹽酸巰醇亞胺加到1.2mL濃度為3.6mg/ml的PE中;
2、將以上混合液和1.2mL pH6.8的PB混合,而后裝入透析袋置入50mmol/L pH6.8的PB中于4℃透析,過夜;
3、再換用pH7.5 PB透析6h。每個(gè)PE分子中可結(jié)合8個(gè)巰基;
巰基PE-IgG的制備;
1、將30μL濃度為1.1mg/ml的異雙功能試劑SPDP的乙醇溶液,加入到700μL的4.2mg/ml IgG PB溶液(50mmol/L pH7.5),在室溫中反應(yīng)2.5h;
2、再將400μL濃度為1.7mg/ml的巰基化PE加到500μL反應(yīng)混合液中,室溫反應(yīng)12h;
3、加入50mmol/L的碘乙酸鈉100μL來封閉殘余巰基,于4℃下用PB透析過夜;
4、最后加入0.01%的Na3 N3后分裝,于4℃保存半年。
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