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2024年01月04日 14:13 來(lái)源：新維創(chuàng)生物科技（重慶）有限公司
1、稱(chēng)取4.08mg PE溶于1mL濃度為0.1mmol/ml pH7.4的PBS中，溶解后，取出0.5mL，再加入濃度為2.65mg/ml的SPDP無(wú)水甲醇液10μL，SPDP/蛋白質(zhì)物質(zhì)的量比為10，22℃反應(yīng)5min，過(guò)Sephadex G-50(1×17cm)，用100mmol/L pH7.4的PBS平衡和洗脫；
2、將0.5mL濃度為2mg/ml的蛋白質(zhì)和100mmol/L pH7.4的PBS液混合，把2.6μL上述SPDP甲醇液加入混合液中，使得SPDP:蛋白質(zhì)=9:5，于22℃下放置40min后，再加如25μL pH7.4的二硫蘇糖醇(DTT)緩沖液，于22℃下反應(yīng)25min后，過(guò)Sephadex G-50，收集蛋白A峰；
3、將0.77mg/ml的PE和0.27mg/ml Protein A等量混合，于22℃下反應(yīng)6h后，將混合物于4℃保存?zhèn)溆茫?/p>
4、將以上兩種PE標(biāo)記制品溶于0.01mol/L pH7.4 PB(含有0.1mol/L DETA、1mol/L碘乙酰胺、1%BSA和0.1% NaN3)中，于0～4℃保存。
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