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2025年03月17日 11:14 來源:http://www.yctengfei.cn/
中文名稱:花菁染料CY3標(biāo)記九聚精氨酸
英文名稱:Cy3-Nonamer Arginine(Cy3-R9)
外觀與劑型
凍干粉末:呈橙紅色絮狀固體,易溶于去離子水或低鹽緩沖液(如PBS),復(fù)溶后溶液澄清透明。
溶液狀態(tài):在水溶液中自組裝為帶正電的納米簇,粒徑約20-50 nm,透射電鏡下呈不規(guī)則網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。
溶解性與穩(wěn)定性
增溶機(jī)制:R9的九聚精氨酸鏈含大量胍基,賦予復(fù)合物高水溶性(>10 mg/mL),無需有機(jī)溶劑輔助。
pH適應(yīng)性:在pH 5-9范圍內(nèi)穩(wěn)定存在,酸性條件下(pH<4)胍基質(zhì)子化增強(qiáng),溶解度進(jìn)一步提升。
光譜特性
熒光參數(shù):Cy3的最大吸收波長550 nm,發(fā)射波長570 nm,與R9的紫外吸收無重疊,避免信號干擾。
量子產(chǎn)率:標(biāo)記后熒光量子產(chǎn)率保持Cy3原有水平的90%,適合定量檢測。
表面電荷與膠體行為
Zeta電位:在生理?xiàng)l件下(pH 7.4)帶正電(+30至+45 mV),易與帶負(fù)電的細(xì)胞膜或核酸結(jié)合。
聚集傾向:高濃度下(>5 mM)可能通過靜電作用形成微米級聚集體,但稀釋后迅速解離。
細(xì)胞穿透能力
跨膜機(jī)制:R9通過“胍基海綿效應(yīng)”吸附細(xì)胞膜磷脂頭部,誘導(dǎo)膜曲率變化,實(shí)現(xiàn)非能量依賴的胞吞。
攝取效率:HeLa細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)顯示,Cy3-R9在1小時內(nèi)進(jìn)入細(xì)胞的比例達(dá)85%,較單用Cy3提高4倍。
核酸結(jié)合特性
siRNA復(fù)合:通過靜電作用與siRNA形成納米復(fù)合物(N/P比=5:1),粒徑約120 nm,保護(hù)核酸免受酶解。
轉(zhuǎn)染效率:在MCF-7細(xì)胞中,Cy3-R9/siRNA復(fù)合物的基因沉默效率達(dá)70%,優(yōu)于脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑。
溫度敏感性
相變行為:在37℃生理溫度下,Cy3-R9納米簇發(fā)生可逆的構(gòu)象變化,增強(qiáng)與靶標(biāo)的親和力。
儲存條件:需-20℃避光保存,反復(fù)凍融不超過3次,以免影響熒光強(qiáng)度。
多模態(tài)兼容性
表面修飾:可通過馬來酰亞胺基團(tuán)偶聯(lián)靶向分子(如抗體或適配體),構(gòu)建多功能遞送系統(tǒng)。
成像適配:Cy3熒光可與MRI造影劑(如Gd3?)或光敏劑(如吲哚菁綠)聯(lián)用,實(shí)現(xiàn)多模態(tài)診療。
動態(tài)光散射(DLS):監(jiān)測溶液中粒徑分布及多分散指數(shù)(PDI<0.3)。
圓二色光譜(CD):分析R9二級結(jié)構(gòu),確認(rèn)α-螺旋含量在標(biāo)記后變化<5%。
等溫滴定量熱法(ITC):測定Cy3-R9與細(xì)胞膜模擬物的結(jié)合常數(shù)(Kd≈1 μM)。
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