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2025年03月17日 11:14 來源：http://www.yctengfei.cn/
中文名稱：花菁染料CY3標記九聚精氨酸
英文名稱：Cy3-Nonamer Arginine（Cy3-R9）
分子設計
R9骨架：由9個精氨酸殘基通過肽鍵連接，N端為氨基，C端為游離羧酸，序列為RRRRRRRRR。
Cy3標記位點：通過賴氨酸側鏈氨基或C端羧酸與Cy3的琥珀酰亞胺酯（NHS）反應，形成穩(wěn)定酰胺鍵。
連接臂策略
短鏈連接：直接偶聯(lián)Cy3-NHS至R9的ε-氨基，標記密度可控（每分子R9標記1-3個Cy3）。
長鏈修飾：引入聚乙二醇（PEG4）間隔臂，減少Cy3與R9的空間位阻，保留穿透活性。
同分異構體控制
區(qū)域選擇性：通過調整反應pH（pH 8.5-9.0）優(yōu)先標記賴氨酸殘基，避免精氨酸胍基副反應。
固相合成法
Fmoc策略：在樹脂上逐步偶聯(lián)精氨酸，最后通過賴氨酸殘基引入Cy3，總產率約60%-70%。
HPLC純化：采用C18反相色譜柱，以乙腈/水（含0.1% TFA）梯度洗脫，分離未標記R9與Cy3-R9。
化學穩(wěn)定性測試
血清穩(wěn)定性：在10%胎牛血清中孵育24小時，Cy3-R9保留率>90%，胍基未發(fā)生顯著水解。
光穩(wěn)定性：在4℃避光保存下，熒光強度每月衰減<5%；暴露于日光下，半衰期約45分鐘。
結構驗證
質譜分析：MALDI-TOF質譜確認分子量（R9 1574.9 Da + Cy3 670.8 Da = 2245.7 Da，含連接臂）。
核磁共振（NMR）：1H NMR譜顯示Cy3芳環(huán)質子峰（δ 7.5-8.0 ppm），確認標記成功。
靶向基團偶聯(lián)
腫瘤靶向：通過點擊化學引入葉酸或RGD肽，構建Cy3-R9-靶向分子復合物。
核酸適配體：將AS1411適配體通過二硫鍵連接至Cy3-R9，實現(xiàn)核仁蛋白特異性識別。
刺激響應性設計
pH敏感鍵：在連接臂中引入腙鍵（-N=N-H-），在腫瘤酸性環(huán)境下斷裂，釋放游離Cy3-R9。
氧化還原響應：通過二硫鍵連接Cy3，在細胞內高GSH濃度下斷裂，實現(xiàn)熒光信號激活。
多藥聯(lián)用平臺
化療藥物共載：通過靜電作用負載阿霉素（Dox），構建Cy3-R9/Dox納米粒，實現(xiàn)熒光示蹤與化療協(xié)同。
基因-藥物共遞送：同時負載siRNA和PTX，構建“三位一體”遞送系統(tǒng)。
日期：2025-03-17
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