熒光染料的選擇要點(diǎn)

熒光基團(tuán)亮度的一個(gè)決定因素是其消光系數(shù); 消光系數(shù)越高，熒光團(tuán)越亮，量子產(chǎn)率是熒光過(guò)程效率的讀數(shù)。

2023/11/20

蛋白/抗體的常用標(biāo)記方法有哪些？

常用的熒光標(biāo)記物有能發(fā)出綠色熒光的異硫氰酸熒光素(FITC)和菁染料琥珀酰亞胺酯(Cy3)，能發(fā)出紅色熒光的四乙基羅丹明(RB200) ，四甲基異硫氰酸羅丹明(TRITC)和化青素(Cy5)等。

2023/11/20

蛋白/抗體的常用標(biāo)記方法介紹

為研究蛋白的性質(zhì)、含量、結(jié)構(gòu)與功能，以及為了方便對(duì)抗原抗體特異性結(jié)合的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象進(jìn)行觀察和檢測(cè)，通常會(huì)選擇利用一些易測(cè)定又具有高度敏感性的物質(zhì)作為標(biāo)記物標(biāo)記抗原，然后通過(guò)檢測(cè)這些標(biāo)記物的增強(qiáng)放大效應(yīng)而產(chǎn)生的顏色變化、光譜變化等來(lái)達(dá)到研究目的。

2023/11/20

蛋白質(zhì)是如何被熒光染料標(biāo)記的？

生物素、FITC一類的染料既可以標(biāo)記在蛋白的氨基端也可以標(biāo)記在蛋白的羧基端。

2023/11/20

酶蛋白偶聯(lián)物

以辣根過(guò)氧化物酶（HRP）和堿性磷脂酶（AP）為代表的酶標(biāo)記物適用于與蛋白偶聯(lián)并為免疫檢測(cè)制備抗體偶聯(lián)物。這兩種標(biāo)記物常被用于標(biāo)記抗體后用作ELISA檢測(cè)。

2023/11/20

生物素標(biāo)記蛋白的原理是什么?

生物素化蛋白質(zhì)是生物素與蛋白質(zhì)共價(jià)結(jié)合的產(chǎn)物，因?yàn)樯锼鼗鞍踪|(zhì)同時(shí)具備了高親和力、高特異性和高靈敏度的優(yōu)點(diǎn)，所以它提高了基于免疫方法的檢測(cè)、純化蛋白質(zhì)技術(shù)的效率。

2023/11/20

熒光染料蛋白體外標(biāo)記

當(dāng)用熒光染料化學(xué)標(biāo)記特異性抗體或其他純化的生物分子時(shí)，它們成為用于檢測(cè)靶抗原或相互作用配偶體的熒光探針，應(yīng)用于細(xì)胞成像、流式細(xì)胞術(shù)、蛋白質(zhì)印跡和酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）。因?yàn)闊晒鈽?biāo)記物具有無(wú)放射物污染、操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)，使其在蛋白功能研究、藥物篩選等許多研究領(lǐng)域的應(yīng)用日趨廣泛。

2023/11/20

FITC熒光標(biāo)記如何標(biāo)記蛋白質(zhì)？新型FITC標(biāo)記方法

熒光染料FITC是如何標(biāo)記蛋白質(zhì)的？以下是新維創(chuàng)生物相應(yīng)操作流程

2023/11/20

熒光標(biāo)記蛋白中最常用的是還是哪些基團(tuán)？

蛋白氨基反應(yīng)，伯胺 (-NH2) 存在于每條多肽鏈的 N-末端 (稱為 α-氨基) 以及賴氨酸殘基的側(cè)鏈中(稱為 ε-氨基)。由于伯胺在生理?xiàng)l件下帶正電荷，因此它通常朝外，使得其更易于偶聯(lián)而不會(huì)使蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)改變。從我們的表中可以看出，許多反應(yīng)基團(tuán)均可以和伯胺基結(jié)合，而在熒光標(biāo)記中，最常用的是還是 NHS 活化酯 (SE)。

2023/11/20

熒光染料如何標(biāo)記蛋白？以及使用過(guò)程中有哪些注意事項(xiàng)？

熒光標(biāo)記指將熒光物質(zhì)共價(jià)結(jié)合或物理吸附在所要研究分子的某個(gè)基團(tuán)上，具有無(wú)放射物污染、操作簡(jiǎn)便、容易觀察等優(yōu)點(diǎn)，可借助熒光特性對(duì)被標(biāo)記對(duì)象進(jìn)行定性、定位以及定量分析。熒光標(biāo)記在蛋白質(zhì)、核酸、細(xì)胞檢測(cè)及免疫分析等方面顯現(xiàn)出巨大潛能。

2023/11/20